一种串联多酶蛋白质微酶解反应器及其使用方法

摘要

本发明涉及一种串联多酶蛋白质微酶解反应器，其特征在于，将两种单一酶的微反应器通过膜接口串联成多酶反应器。本发明的串联多酶蛋白质微酶反应器两种酶的固定和酶解都是独立进行，互不干扰；该酶反应器的膜接口可以通过溶液交换满足不同蛋白酶的酶解条件；根据样品需要，选择合适的蛋白酶，不受不同酶间酶解条件差异的限制，且可方便调节不同蛋白酶的酶解顺序，操作容易；特别适用于膜蛋白等复杂样品的酶解；该酶反应器膜实现酶解、富集、鉴定的一体化，降低样品的离线损失，从而大大提高蛋白质分析鉴定的效率。

主权项

一种串联多酶蛋白质微酶解反应器，其特征在于，一 单酶酶解柱的制备酶反应器装置中的酶通过吸附法、包埋法、共价键合法、交联法中的任意一种方式固载在毛细管中，毛细管微酶解柱的长度为2‑10厘米，内径为50‑200微米；二 酶反应器的串联将两根固定有不同蛋白酶的单酶反应器末端约5mm长的涂层去除，并用硅橡胶密封，浸入HF溶液中刻蚀2小时，然后用清水洗去吸附的HF，此时去涂层的酶反应器外径小于中空纤维膜的内径；取一段中空纤维膜，将酶反应器被刻蚀的末端穿人中空纤维膜中，然后用环氧胶将酶反应器与中空纤维膜固定；待胶完全凝固后将此接口固定于用透明塑料管制备的容器中，容器上部开两孔作为缓冲溶液的出、入口；由此得到串联多酶蛋白质微酶解反应器。