人乳头瘤病毒检测的方法

摘要

本发明涉及一种用于诊断人乳头瘤病毒（HPV）感染的检测方法，该方法可以检测患者体内分离出的DNA样本中HPV基因型并诊断其属于所述30个型中的某一型。属于生命科学和技术领域。本发明的方法包括一个以PCR为技术基础聚合酶链式反应（PCR），包含针对多种型别的特异性的上游引物和简并的下游引物，在特定PCR条件下可在若干个反应管中同时检测HPV6、11、26、40、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、54、56、58、59、61、66、68、70、72、73、81、82和83等30种型的DNA，并利用荧光定量PCR仪显示的结果直接将其分为具体的型。

主权项

一种人乳头瘤病毒检测的方法，其特征在于：该方法含有： （1）DNA提取：NP‑40；chelex100；TRIS‑HCL；（2）DNA聚合酶；Taq HS DNA聚合酶，UNG酶；（3）PCR反应液：dNTPs，引物，DNA聚合酶，PCR Buffer，SYBR染料；（4）PCR反应体系：引物具体信息如表1。 表1 引物名称 序列 F6 AACTACATCTTCCACATACAC F11 GTCTAAATCTGCTACATACAC F16 ATTATGTGCTGCCTTATTTACTTC F18 TGCTTCTACACAGTCTCCT F26 AAGGCCGAAATTCCT F31 TATGTCTGTTTGTGCTGC F33 AGTGACAGTACATATAAAAATGAA F35 GTGTTCTGCTGTGTCTTCTA F39 GAGTCTTCCATACCTTCT F40 CCCCACACCAACCCCATA F42 CATGACTTTTTGTGCCACTGC F43 TGCCTCTACTGACC F44 CTACACAGTCCCCTCC F45 TGCCTCTACACAAAAT F51 CTGCTGCGGTTTCC F52 ATGTGCTGAGGATAAAAAG F53 CGCAACCACACAGTCTAT F54 ACAGCATCCACGCAGG F56 ACTGCTACAGAACAGTTAAGTAAATA F58 CACTGAAGTAACTAAGG F59 TTCTACTACTTCTTCTATTCCTAA F61 AACCGCTATTCCTAAGGTGTCTG F66 AAAAACACATTAACTAA F68 TTTGTCTACTACTACTGAA F70 GCCATACCTGCTGT F72 AACCGCTATTCCTAAGG F73 TGTAGGTACACAGGCTAGTAG F81 GCTACATCTGCTGCT F82 CACTGCTGTTACTCAATCTGT F83 GCTACACAGGCAAATGAATACACA R09 CGTCCMARRGGAWACTGATC GH20 GAAGAGCCAGGACAGGTAC PCO4 CAACTTCATCCACGTTCACC