一种用于转基因大豆、玉米和棉花检测的标准质粒分子及其构建

摘要

本发明公开了一种转基因作物检测中必要的标准质粒分子及其构建方法。将八基因质粒分子pTLE8(专利申请号201010286884.3)进行改造，增加转基因玉米Bt176品系和Mon810品系的3′端转化事件特异性序列和玉米内参基因Hmg特异性序列的融合片段，改造成十基因的质粒分子pTLH10(Lec1，35S，NOS，PAT，Sad1，Cry1Ab/c，Bt176，Mon810和Hmg)。本发明中构建的标准质粒分子完全可以代替阳性标准品，适用于对转基因大豆GTS40-3-2品系、转基因玉米Bt176和Mon810品系及转Bt基因棉花的筛选、基因特异性和品系特异性的定性和定量PCR分析和检测。

主权项

一种转基因大豆、玉米和棉花检测用标准质粒分子，其特征在于，含有大豆内参基因Lectin 1、35S启动子、NOS终止子、PAT基因、转基因大豆GTS40‑3‑2品系的5′端转化事件35SG、棉花内源基因Sad特异性片段、转Bt基因棉花的外源基因Cry1Ab/c融合基因的特异性片段、玉米内参基因Hmg特异性片段、转基因玉米Bt176品系的3′端转化事件和Mon810品系的3′端转化事件特异性片段的部分序列，其先后顺序为Lectin 1+35S+NOS+PAT+35SG+Sad+Cry1Ab/c+Bt176+Mon810+Hmg，其中转基因玉米Bt176品系的3′端转化事件、Mon810品系的3′端转化事件和玉米内参基因Hmg特异性序列的引物序列见下表。