狗骨蛆虫蛋白质的制备方法及其在制备抗皮肤癌药品中的应用

摘要

本发明公开了一种狗骨蛆虫蛋白质的制备方法及其在制备抗皮肤癌药品中的应用，所述狗骨蛆虫蛋白质制备方法如下：将狗骨蛆虫在常温膨化装置中膨化粉碎；然后加入到膨胀溶剂体系提取装置中提取出狗骨蛆虫蛋白质粗品；收集含有狗骨蛆虫蛋白质粗品的溶液并用微孔过滤器过滤去掉杂质；用超滤机超滤处理，收集狗骨蛆虫蛋白质超滤溶液；超滤液溶解在乙腈中用固相萃取柱分离，收集洗脱成分；将洗脱成分溶解在溶剂体系中，用超声驻波液相制备色谱分离纯化；用真空冷冻干燥机制备成冻干蛋白粉，可用于制备抗皮肤癌药品。本发明分离的纯化狗骨蛆虫蛋白质为非均一蛋白质，相对分子量为10.9~12.6KPa，等电点为pH8.8~10.2，不含糖基，纯化的狗骨蛆虫蛋白质含量为96.7%。

主权项

一种狗骨蛆虫蛋白质的制备方法，其特征在于所述制备方法步骤如下：（1）将1000g狗骨蛆虫在常温膨化装置中常温条件下膨化粉碎；（2）膨化粉碎后的物料加入到膨胀溶剂体系提取装置中，加入由1~10Kg液态二氧化碳、100~500mL甲醇及100~300gNH₃·H₂O组成或由1~10Kg液态二氧化碳、100~500mL乙醇及100~300g氯化铵组成的膨胀溶剂并加压至2~10MPa，形成膨胀溶剂体系，提取出狗骨蛆虫蛋白质粗品；（3）收集含有狗骨蛆虫蛋白质粗品的溶液并且用微孔过滤器过滤去掉杂质；（4）用超滤机超滤处理，收集狗骨蛆虫蛋白质超滤溶液；（5）超滤液溶解在乙腈中用固相萃取柱分离，收集洗脱成分；（6）将洗脱成分溶解在由正丁醇‑乙酸乙酯‑水按体积比1.25:3.75:5组成或由聚乙二醇‑葡聚糖T500按重量比4.5:7组成的溶剂体系中，用超声驻波液相制备色谱分离纯化；（7）纯化后的狗骨蛆虫蛋白质用真空冷冻干燥机制备成冻干蛋白粉。