一种羧基二羟鬼笔毒肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种羧基二羟鬼笔毒肽的制备方法。该方法采用反向高效液相色谱技术，从致命鹅膏Amanita exitialis子实体中提取羧基二羟鬼笔毒肽。在紫外吸收最大波长290nm处，收集在制备柱保留时间为33.376(分析柱保留时间为33.014)的组分，得到纯度为98％的羧基二羟鬼笔毒肽化合物。本发明提取的化合物对人宫颈癌Hela细胞株和人肝癌细胞7402的生长增殖均具有一定的抑制作用。

主权项

一种羧基二羟鬼笔毒肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将致命鹅膏菌(Amanita exitialis)子实体烘干粉碎成粉末状，经甲醇或甲醇水溶液抽提后用石油醚去脂，甲醇溶液浓缩去甲醇，获得粗毒素提取液；将粗毒素提取液采用反相高效液相色谱分离，反相高效液相的分离条件和参数如下：半制备柱为Hypersil BDS C18，5μm，ID10mm×250mm；二极管阵列检测器为SPD‑M20A，检测波长295nm，洗脱液由A、B两液混合，按体积分数计，A液：10％乙腈，90％0.02mol/L醋酸铵；B液：24％乙腈，76％0.02mol/L醋酸铵，用冰醋酸调节至pH5.0，纯化梯度模式为：0→15min，A液100％→95％，B液0％→5％；15→35min，A液95％→20％，B液5％→80％，35→40min，A液20％→15％，B液80％→85％；40→50min，A液15％→0％，B液85％→100％；50→55min，A液0％→100％，B液100％→0％，保持10min，柱温：35℃；流速：3mL/min，收集保留时间为33.376的组份，即为羧基二羟鬼笔毒肽。