发明名称 |
一种榆树枯萎病菌的分子检测方法 |
摘要 |
本发明公开了一种榆树枯萎病菌的分子检测方法,以待测样品DNA为模板,以通用引物ITS1-F/ITS4-B进行巢式PCR的第一轮反应,以第一轮反应产物为模板,以引物OpF和引物OpR为特异性引物,进行巢式PCR的第二轮反应,反应产物进行电泳检测,电泳图中出现304bp条带即为检测出榆树枯萎病菌,否则未检出;其中,引物OpF序列为:5'-GCCCGCCACTGGTTTTGA-3';引物OpR序列为:5'-CCGCCCGAACCTTTTCCA-3'。该方法为榆树枯萎病菌的检测和评估提供一种准确、快速的途径,引物OpF和引物OpR具有很强的特异性,本方法的检测灵敏度能够达到常规PCR的10倍。 |
申请公布号 |
CN104630371A |
申请公布日期 |
2015.05.20 |
申请号 |
CN201510078255.4 |
申请日期 |
2015.02.13 |
申请人 |
南京林业大学 |
发明人 |
叶建仁;陶兆雪;王焱;张培;吴小芹;周爱东 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
江苏圣典律师事务所 32237 |
代理人 |
贺翔 |
主权项 |
一种榆树枯萎病菌的分子检测方法,其特征在于:以待测样品DNA为模板,以通用引物ITS1‑F/ITS4‑B进行巢式PCR的第一轮反应,以第一轮反应产物为模板,以引物OpF和引物OpR为特异性引物,进行巢式PCR的第二轮反应,反应产物进行电泳检测,电泳图中出现304bp条带即为检测出榆树枯萎病菌,否则未检出;其中,引物OpF序列为:5'‑GCCCGCCACTGGTTTTGA‑3';引物OpR序列为:5'‑CCGCCCGAACCTTTTCCA‑3'。 |
地址 |
210037 江苏省南京市龙蟠路159号 |