一种鲜鹿茸酶降解提取有效成分的方法

摘要

本发明提供一种鲜鹿茸酶降解提取有效成分的方法。鲜鹿茸经Alcalase碱性蛋白酶降解处理后，获得鹿茸的生物活性物质的浓缩液，其降解率为82％～93％；获得鹿茸的生物活性物质的浓缩液中，含有脂肪酸、磷脂、甾体化合物、糖类、微量元素等多种有效成分，所有的有机质都变成了易于人体吸收的溶液状态，可用于制药、保健品、食品、化妆品诸多方面；用Alacalase碱性蛋白酶降解鲜鹿茸，鲜鹿茸降解后的残渣物为鹿茸钙化物质及无机元素等，可用作良好的饲料添加剂；鹿茸的生物活性物质的浓缩液分离纯化后得到纯度为97％的氨基酸产品为重要的营养品，氨基酸的收率达到12％以上。本发明的反应条件温和、操作简单、鹿茸的全部有效成分都能被充分利用，提高了鹿茸的应用价值和经济效益。

主权项

一种鲜鹿茸酶降解提取有效成分的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）鲜鹿茸经燎毛、洗净，在4～6 ℃的条件下机械切成片状；（2）取切成片状的鲜鹿茸，按底物浓度为0.05g/mL～0.20g/mL的比例加入缓冲溶液，用胶体磨粉碎至微米级，调pH值为7～10,按切成片状的鲜鹿茸重量的0.01～0.03倍加入Alcalase碱性蛋白酶，在温度为50 ℃～70℃条件下降解3h～8h，降解过程保持pH值恒定,降解后90‑95 ℃加热15min，将Alcalase碱性蛋白酶灭活；所用缓冲溶液为pH值为9～12的碳酸钠缓冲溶液或碳酸氢钠缓冲溶液；（3）用滤纸或离心过滤去除鲜鹿茸降解后的残渣物，收集滤液，将得到的滤液减压蒸馏，浓缩，获得鹿茸的生物活性物质的浓缩液；（4）将过滤得到的鲜鹿茸降解后的残渣物烘干；（5）将已处理好的氢型732强酸性阳离子交换树脂装入两支串联的柱子里，将步骤（3）的获得鹿茸的生物活性物质的浓缩液调pH值为2‑5后上柱，吸附3‑6h，用蒸馏水洗脱，至收集液使茚三酮显阳性，再用洗脱剂洗脱至使茚三酮显阴性，得到鹿茸有效成分氨基酸；所述的洗脱剂为NH₄Cl溶液、NH₄Ac溶液或NH₃.H₂O；氢型732强酸性阳离子交换树脂的处理方法为：将树脂置于其两倍量的浓度为26.5%的食盐溶液中浸泡18‑20小时，然后放尽食盐水，用清水漂洗净，使排出水不带黄色；再用与食盐溶液量相同的浓度为2%‑4%的NaOH溶液浸泡2‑4小时，或作小流量清洗，放尽碱液后，用清水冲洗树脂直至排出水接近中性为止，最后用与食盐溶液量相同的浓度为5%的HCl溶液浸泡4‑8小时，放尽酸液，用清水漂流至中性待用。