从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶（SOD）的工艺

摘要

本发明公开了从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺。将新鲜辣木叶粉碎打浆，浸提，压滤，等电点沉淀，离心后得到沉淀物和上清液；对沉淀物进行修饰保护、热变性反应、冷冻干燥处理得超氧化物歧化酶(SOD)冻干粉；上清液经等电点沉淀、离心、喷雾干燥制得叶蛋白粉。本发明采用常温下浸提、等电点沉淀、修饰保护和离心分离等技术方法，最大限度地保持了蛋白质原有的功能特性和酶的活性，提高了蛋白质和活性酶的产量，得到的叶蛋白粉色泽好，蛋白质含量高，质量稳定，得到的超氧化物歧化酶(SOD)活性高，具有较高的实用价值和经济效益。本发明操作简单，生产成本低，安全可靠，适合工业化生产。

主权项

从辣木叶中提取蛋白质和超氧化物歧化酶(SOD)的工艺，其特征在于：包括以下工艺步骤：（1）取辣木新鲜叶，除杂清洗，加入辣木鲜叶重量2～8倍的缓冲液，粉碎打浆，在常温下搅拌浸提1～4小时，压榨过滤，收集滤液；（2）将步骤（1）所得滤液进行高速离心分离，收集上清液；（3）取步骤（2）所得上清液，调整PH值至4.9～5.2，于0～4℃下静置30～40分钟后，高速离心，分别收集沉淀物和上清液；（4）取步骤（3）所得沉淀物，加入去离子水溶解，得超氧化物歧化酶(SOD)粗品溶液，将SOD粗品溶液加热升温至42℃，用2N NaOH溶液调整PH值至9.0，滴加SOD粗品溶液总质量0.01%～0.05%的修饰保护剂，搅拌，保温反应1小时后，快速冷却至30℃以下，离心，收集上清液，用1N HCl调整PH值至6.2～6.8，快速升温至60～70℃，不断搅拌，保温处理10分钟后，快速冷却至30℃以下，离心，收集上清液；（5）取步骤（4）所得上清液，边搅拌边缓慢加入上清液体积1.2～1.8 倍的预冷过的95%乙醇，于0～4℃下静置10～15分钟后，离心，收集沉淀，再用去离子水溶解，离心，收集上清液，冷冻干燥，即得超氧化物歧化酶(SOD)精品冻干粉；（6）取步骤（3）所得上清液，用1N HCl溶液调整PH值至4.0～4.3，于0～4℃下静置30～40分钟后，高速离心，收集沉淀，用缓冲液溶解，喷雾干燥，即得辣木叶蛋白粉。