发明名称 一种催化效率提高的葡萄糖氧化酶
摘要 本发明公开了一种催化效率提高的葡萄糖氧化酶,属于酶工程技术领域。本发明采用基因重组技术将葡萄糖氧化酶524位点的甲硫氨酸突变为亮氨酸,并转化入毕赤酵母Pichia pastoris GS115中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株催化效率提高的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在50mL摇瓶上酶活64.6U/mL,比野生型提高了近10%。催化效率Kcat/Km为76.98mM<sup>-1</sup>·s<sup>-1</sup>,比野生型(16.73mM<sup>-1</sup>·s<sup>-1</sup>)提高了近4.5倍。
申请公布号 CN103614350B 申请公布日期 2015.05.13
申请号 CN201310699636.5 申请日期 2013.12.18
申请人 江南大学 发明人 陈坚;闻一凡;张娟;堵国成;顾磊;刘晓筱
分类号 C12N9/04(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N 主分类号 C12N9/04(2006.01)I
代理机构 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 代理人 何自刚;王玉松
主权项 一种葡萄糖氧化酶突变体,是以SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列为出发序列,将催化活性中心的甲硫氨酸突变为亮氨酸;所述突变体是将第524位的甲硫氨酸M突变为亮氨酸L,突变后的葡萄糖氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
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