制备成熟胰岛素多肽的方法

摘要

本发明涉及通过培养含有编码人胰岛素类似物前体的DNA载体的真菌细胞来制备人胰岛素类似物的方法，其中所述前体含有连接肽，在所述连接肽两侧与胰岛素肽A-和B-链的两个接点处分别带有切割位点，所述切割位点在真菌细胞内被切割，从而允许细胞向培养基中分泌大量正确加工的成熟、双链人胰岛素类似物。

主权项

通过培养含有编码具有下式的人胰岛素类似物前体的DNA载体的真菌细胞来制备成熟人胰岛素类似物的方法，B(1‑30)‑X‑X‑Z‑Y‑Y‑A(1‑21)其中B(1‑30)是B‑链人胰岛素的类似物，A(1‑21)是A‑链人胰岛素的类似物，X‑X和Y‑Y均为Lys‑Arg，且Z为AspGlyLeuGly，其中人胰岛素A‑和/或B‑链的类似物包含包括在A14位的突变Glu在内的3个突变，所述Lys‑Arg在真菌细胞内被切割，从而允许细胞向培养基中分泌正确加工的成熟、双链人胰岛素类似物。