发明名称 快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法
摘要 本发明公开了一种快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法,将直链淀粉和支链淀粉标准品溶液进行波长扫描,分别找出直链淀粉和支链淀粉标准品溶液的吸收峰波长;根据Lambert-Beer定律,通过绘制标准曲线的方式得到两种淀粉组分在吸收峰位置的摩尔吸光系数,联立方程组求解两种淀粉浓度的计算公式,用于快速批量测定。本发明采用比色法可同时测定直链淀粉、支链淀粉和总淀粉的含量,而且准确度高,方便快捷。解决了传统的淀粉测定方法每次只能测定直链淀粉含量或者总淀粉含量,而不能同时测定直链淀粉和支链淀粉含量问题;而且本发明建立的方法不使用浓硫酸、浓盐酸和有毒试剂,使之更加绿色环保、安全性高,成本低廉,使用效果理想。
申请公布号 CN103091273B 申请公布日期 2015.05.13
申请号 CN201310029030.0 申请日期 2013.01.25
申请人 贵州大学 发明人 张明生;李祥栋;王洋
分类号 G01N21/33(2006.01)I 主分类号 G01N21/33(2006.01)I
代理机构 贵阳中新专利商标事务所 52100 代理人 李亮;程新敏
主权项 一种快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法,其特征在于:将直链淀粉和支链淀粉标准品溶液进行波长扫描,分别找出直链淀粉和支链淀粉标准品溶液的吸收峰波长;根据Lambert‑Beer定律,通过绘制标准曲线的方式得到两种淀粉组分在吸收峰位置的摩尔吸光系数,联立方程组求解两种淀粉浓度的计算公式,用于快速批量测定;具体步骤如下:(1)配制终浓度为0.001~0.1 mg/mL碘‑淀粉显色反应体系,调节pH 3.0~5.0,显色10~30 min,以双光束可见‑紫外分光光度计进行可见光范围内的波长扫描,根据两种淀粉溶液的吸收曲线,找出它们的吸收峰波长λ<sub>1</sub>(500~560 nm)、λ<sub>2</sub>(580~700 nm);(2)按步骤(1)配置显色反应体系的方式,分别配制终浓度为0~0.04 mg/mL的直链淀粉溶液的显色反应体系与终浓度为0~0.1 mg/mL的支链淀粉溶液的显色反应体系,在波长λ<sub>1</sub>、λ<sub>2</sub>处测定吸光度,以浓度<i>C</i>为横坐标,吸光度<i>A</i>为纵坐标绘制标准曲线,其斜率即为摩尔吸光系数k<sub>a1</sub>、k<sub>a2</sub>、k<sub>b1</sub>、k<sub>b2</sub>,根据Lambert‑Beer定律,联立二元一次方程组,求解得两种淀粉的<i>C</i>与<i>A</i>之间的计算公式为:<img file="706350dest_path_image001.GIF" wi="575" he="224" />(3)选取待测定的高粱籽粒磨碎,过40~80目筛,称取50~150 mg过筛的高粱粉配制成浓度为0.5~1.5 mg/mL的高粱粉分散液,取分散液20~40 mL,并加入5~20 mL沸程为30~60℃的石油醚,间歇摇匀5~20 min,静置10~30 min,重复脱脂2~3次,获得脱脂分散液;(4)取上述的脱脂分散液3~10 mL,按步骤(1)配制显色反应体系,按步骤(2)计算直链淀粉和支链淀粉的浓度,并根据稀释倍数和样品质量计算其百分含量,总淀粉含量为直链淀粉与支链淀粉含量之和。2、根据权利要求1所述的快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法,其特征在于:所述的步骤(1)中,反应体系的pH为3.5~4.0,显色时间15~25 min,吸收峰波长λ<sub>1</sub>=530 nm,λ<sub>2</sub>=622 nm。3、根据权利要求1所述的快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法,其特征在于:所述的步骤(3)中,磨碎的高粱粉过60目筛,称取质量为90~110 mg高粱粉,高粱分散液浓度为0.9~1.1 mg/mL,取分散液体积为25~30 mL,加入的石油醚体积为10~15 mL,脱脂2次。
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