二咖啡酰奎宁酸制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种由金银花叶提取二咖啡酰奎宁酸的方法，还涉及所述二咖啡酰奎宁酸及其用途。该方法包括原料采收及预处理、有效成分提取、大孔吸附树脂预处理与柱层析分离等步骤。本发明的二咖啡酰奎宁酸对肉品中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌具有很好的抑制效果，对肉品保鲜效果好，能很好地控制肉品颜色、挥发性盐基氮、细菌总数等的变化。本发明方法使用乙醇作为提取溶剂，避免使用化学防腐剂所带来的不安全性，本方法操作简单，成本低廉，便于广泛推广使用。

主权项

一种从金银花叶片中提取二咖啡酰奎宁酸的方法，其特征在于该方法的步骤如下：A、原料采收及预处理6‑8月份采收的金银花叶，置于电热恒温鼓风干燥箱中在温度38～42℃下鼓风干燥6～10小时，干燥的绿色金银花叶片进行粉碎，通过40目筛得到金银花叶粉；B、有效成分提取按照以kg计金银花叶粉与以L计提取溶剂的比1:15～20，使用55～65重量％乙醇水溶液提取溶剂，对步骤A得到的金银花叶粉在温度68～72℃的条件下加热回流提取1.5～2.5h，然后进行离心分离，上清液使用旋转蒸发仪在温度52～58℃与压力0.001～0.01MPa的条件下进行减压浓缩，浓缩物在温度‑55℃下再进行冷冻干燥，得到粗提物；C、大孔吸附树脂预处理大孔吸附树脂用无水乙醇浸泡20～28小时，让其充分溶胀，然后用无水乙醇淋洗直至得到的析出液与等量蒸馏水混合后无白色浑浊现象，再用去离子水淋洗至无乙醇，然后依次用4～6重量％盐酸、纯水、4～6重量％氢氧化钠水溶液进行浸泡，流过树脂柱，其浸泡液与树脂的体积比为2～4；最后用大量纯水进行洗涤，洗涤至流出水为中性，然后沥干树脂，待用；D、柱层析分离称取25～35克在步骤B得到的粗提物溶解于18～22重量％乙醇水溶液中，让其以130～200ml/min通过5cm×60cm大孔吸附树脂层析柱进行吸附，所述的大孔吸附树脂是HPD500大孔吸附树脂或NKA‑2大孔吸附树脂；再分别让水、40～45重量％乙醇水溶液、52～58重量％乙醇水溶液洗脱剂以流速0.8～1.2BV/h分别通过其层析柱进行梯度洗脱，各洗脱剂的总量为4～6BV，分步收集洗脱液，采用高效液相色谱法检测其成分，合并含有相似成分的洗脱液，然后进行真空浓缩，冷冻干燥，与标准物质的高效液相色 谱和质谱对比确定，其52～58重量％乙醇洗脱液冻干物为二咖啡酰奎宁酸。