一株以酪氨酸为底物合成柚皮素的基因工程菌及其构建方法

摘要

本发明公开了一株以酪氨酸为底物合成柚皮素的基因工程菌及其构建方法，属于合成生物学或代谢工程领域。本发明将编码丙二酸转运酶的基因matB、丙二酸吸收途径的基因matC、酪氨酸脱氨酶(TAL)的基因、4-香桂酸：辅酶A连接酶(4CL)基因、查尔酮合成酶(CHS)基因、查尔酮异构酶(CHI)基因，共计六个基因组成的合成途径引入大肠杆菌BL21，从而获得了一株能以酪氨酸为底物合成柚皮素的重组菌，并通过模块化改造理论优化合成途径，最终菌株在摇瓶中以酪氨酸为底物发酵72h后，柚皮素的产量达到90mg/L。本发明采用的策略为今后微生物法生产天然小分子物质提供了一定的借鉴意义。

主权项

一株以酪氨酸为底物合成柚皮素的基因工程菌，其特征在于，是在Escherichia coli(BL21)中表达了柚皮素合成途径需要的关键酶系：酪氨酸脱氨酶TAL、4‑香桂酸：辅酶A连接酶4CL、查尔酮合成酶CHS、查尔酮异构酶CHI、丙二酸转运酶matC以及丙二酸吸收酶matB；编码所述丙二酸转运的基因matC核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码所述丙二酸吸收酶的基因matB核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码所述酪氨酸脱氨酶TAL的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，编码所述4‑香桂酸：辅酶A连接酶4CL的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，编码所述查尔酮合成酶CHS的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，编码所述查尔酮异构酶CHI的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。