同时测定马钱素芍药苷黄芩苷与黄芩素单体质量浓度的方法

摘要

本发明公开了一种同时测定马钱素芍药苷黄芩苷与黄芩素单体质量浓度的方法，属于用色谱法分析材料。本发明分别制备山茱萸、白芍、黄芩混合样品以及供试样品阴性对照溶液，在流动相为乙腈：0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱：0～15 min时，乙腈为14%～16.5%；15～30 min时，乙腈为16.5%～80%；30～31 min时，乙腈为80%～14%；波长在0～15 min时为236 nm，在15～30 min时为278 nm，在30～31 min时为平衡的条件下，进行工作曲线的制备和四种单体的色谱分离及含量的测定。本发明方法简单快速，分离度佳，实验数据准确可靠，是一种良好的质控检测手段。

主权项

一种同时测定马钱素芍药苷黄芩苷与黄芩素单体质量浓度的方法，其特征在于：包括以下步骤：a．样品的预处理干燥至恒重的山茱萸、白芍、黄芩，粉碎后过40目筛，按重量份数比分别称取山茱萸4.5份、黄芩1份、白芍4.5份，混合后加入100份的甲醇，超声波提取，滤液过0.22μm微孔滤膜，进样量3～9μl；供试样品缺山茱萸阴性对照溶液的制备：精称黄芩1份、白芍4.5份，加入55份的甲醇，提取、制备、进样量同上；供试样品缺黄芩阴性对照溶液的制备：精称山茱萸1份、白芍1份，加入20份的甲醇，提取、制备、进样量同上；供试样品缺白芍阴性对照溶液的制备：精称山茱萸4.5份、黄芩1份，加入55份的甲醇，提取、制备、进样量同上； b．高效液相色谱操作条件色谱柱：150 ×46 mm，5 μm ，ZORBAX SB‑C18；流动相为乙腈：0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱：0～15 min时，乙腈为14%～16.5%；15～30 min时，乙腈为16.5%～80%；30～31 min时，乙腈为80%～14%；波长在0～15 min时为236 nm，在15～30 min时为278 nm，在30～31 min时为平衡；体积流量0.8~1.2 mL/min；柱温25~40 ℃；    超声波提取的条件为250W，40KHz，20℃，超生提取30min；c. 工作曲线的制备分别精密称取马钱素对照品0.82 mg、芍药苷对照品1.03 mg、黄芩苷对照品0.96 mg、黄芩素对照品0.29 mg，配成1mL的甲醇混合对照品溶液，并进行倍比稀释，共得到四种单体混合对照品稀释溶液的12个质量浓度，取后9个质量浓度进样测定的峰面积与对应浓度绘制标准曲线；各质量浓度液体分别过0.22 μm微孔滤膜，进样5μL进行色谱分析，以峰面积A对浓度C进行线性回归，同时得到四种单体成分工作曲线；d. 四种单体成分的色谱分离及含量的测定将经过预处理的山茱萸、白芍、黄芩样品进行上机测定，对马钱素、芍药苷、黄芩苷、黄芩素四种单体成分进行色谱分离，并根据供试样品中每个中药单体成分对应的峰面积由相应的工作曲线分别计算出四种单体成分的含量。