编码细菌L-氨基酸α-连接酶的DNA以及其在生产二肽中的应用

摘要

本发明描述了新型细菌L-氨基酸α-连接酶，其催化在N端具有酸性L-氨基酸如L-Asp或L-Glu的二肽的形成反应。描述了使用所述L-氨基酸α-连接酶和肠杆菌科的细菌生产二肽的方法，所述细菌特别是属于埃希氏菌属的细菌，其被修饰以含有编码所述L-氨基酸α-连接酶的DNA。

主权项

一种编码具有二肽合成活性的蛋白的DNA，其中所述DNA选自由下述DNA组成的组：(A)具有SEQ ID NOs：1，3或5所示核苷酸序列的DNA；(B)在严格条件下与互补于SEQ ID NOs：1，3或5所示序列的核苷酸序列杂交的DNA，其中所述严格条件包括在60℃或65℃，在包含1×SSC，0.1％SDS或0.1×SSC，0.1％SDS的盐浓度的溶液中洗涤一次或多次；(C)编码具有SEQ ID NOs：2，4或6所示氨基酸序列的蛋白的DNA；(D)编码变体蛋白的DNA，所述变体蛋白具有SEQ ID NOs：2，4或6所示氨基酸序列、但其包括取代、缺失、插入或添加一个或数个氨基酸残基并具有根据SEQ ID NOs：2，4或6所示氨基酸序列的二肽合成活性；(E)编码蛋白的DNA，所述蛋白具有与SEQ ID Nos：2，4或6的氨基酸序列相比不低于128，不低于142，不低于162，不低于175，不低于182，不低于196，或不低于233的用|Log10(E‑value)|数值定义的同源性，并具有根据SEQ ID Nos：2，4或6的氨基酸序列的二肽合成活性。