高盐度驯化提高微藻生长速率和细胞油脂含量的方法

摘要

本发明涉及生物质能利用技术，旨在提供高盐度驯化提高微藻生长速率和细胞油脂含量的方法。该方法包括步骤：将微藻液体接种到三角瓶的培养基上放大培养，然后按0.3％的盐度梯度增加，直至将藻种接种到初始盐度为2.9～3.1％的培养基中连续培养3～5代，即获得能快速生长的高油脂含量藻种。本发明采用高盐度梯度驯化方法，微藻细胞的碳氮代谢途径以及油脂合成途径进行了重建，脯氨酸、ABC转运蛋白、蛋白酶体、谷胱甘肽的代谢通路变化较大，乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、β-酮脂酰-ACP合酶I和II等关键生物酶表达量上调，从而有效提高了微藻生长速率和细胞富集油脂的能力。

主权项

高盐度驯化提高微藻生长速率和细胞油脂含量的方法，其特征在于，具体包括下述步骤：(1)按接种量为5％～10％将微藻液体接种到1L的三角瓶，三角瓶中预先装800mL的培养基；在恒温20～25℃、每天依次光照12h和黑暗12h的条件下通入空气放大培养10～15天，且光照时的光照强度为3500～4000lux；(2)取扩大培养后的藻种以5～10％接种量接种到容量为400mL圆柱瓶中，圆柱瓶中的培养基为250～350mL，初始盐度为0％，通入70～90mL/min的空气，培养8～12天后以5～10％的接种量转接入到盐度为0.2～0.4％的培养基中培养8～12天；(3)取步骤(2)中培养后的藻液以5～10％的接种量转接入到盐度为0.5～0.7％的培养基中培养8～12天，按盐度梯度为0.3％重复上述步骤直至将微藻接种至盐度为2.9～3.1％的培养基中；(4)将上述藻种在盐度为2.9～3.1％的培养基中连续培养3～5代，即获得能快速生长的高油脂含量藻种。