一种玻璃表面接枝用于蛋白质结晶的方法

摘要

本发明提供了一种玻璃表面接枝用于蛋白质结晶的方法，将用酒精或者丙酮超声处理后的玻璃片浸泡在浓硫酸和双氧水中；再用去离子水清洗玻璃表面至酸碱度为中性，用有机溶剂稀释的硅烷溶液浸泡后得到玻璃基底，制备蛋白质结晶溶液并滴在玻璃基底的表面上，呈液滴状，静置结晶；在显微镜下观察，统计出现蛋白质晶体的条件数目。本发明通过对结晶玻璃表面进行官能团接枝，使得蛋白质在玻璃表面浓缩，同时在该底面形成有序的结构，降低形核的表面能，从而提高了蛋白质结晶成功率。

主权项

一种玻璃表面接枝用于蛋白质结晶的方法，其特征在于包括下述步骤：(a)将用酒精或者丙酮超声处理后的玻璃片浸泡在体积比为8:1的浓硫酸和双氧水中50h，所述的浓硫酸浓度为98％；用去离子水清洗玻璃表面至酸碱度为中性，用有机溶剂稀释200倍的十六烷基三甲氧基硅烷溶液浸泡10h，然后用同样的有机溶剂清洗玻璃基底，烘干备用；(b)配置pH值在3～10，浓度范围为0.05～0.5M的缓冲液，使用缓冲液溶解蛋白质，使蛋白质溶液中蛋白质的终浓度达到5～30mg/ml；(c)将结晶试剂与蛋白质溶液按照(0.1～20)：1体积比混合，制备蛋白质结晶溶液；(d)将制备的蛋白质结晶溶液滴在玻璃基底的表面上，呈液滴状，在0～60℃下静置结晶；在显微镜下观察，统计出现蛋白质晶体的条件数目。