一种快速分离细胞外吐小体的方法

摘要

本发明涉及一种快速分离细胞外吐小体的方法。所述方法包括：收集活细胞培养上清，离心去除细胞碎片后，收集上清于截留分子量为100KD的超滤管中超滤10～15min，收集上清得到浓缩液，将浓缩液加入至体积为浓缩液体积4～10倍的含有0.1～0.2％(v/v)胎牛血清的pH9～12磷酸盐缓冲液中，在140000～150000g、4℃下超速离心70～90min，取沉淀，重悬于pH9～12的磷酸盐缓冲液中，即得所述外吐小体。本发明的有益效果主要体现在：1、分离时间短。2、得率高。3、纯度高。

主权项

一种快速分离细胞外吐小体的方法，所述方法包括：收集活细胞培养上清，离心去除细胞碎片后，加入终浓度分别为1～2mg/ml的RNA酶、6～8％的甘油和6～7mM的山梨醇，之后使用真空离心浓缩仪于16～20℃、1500～2000g离心浓缩10～15min，得到浓缩液，将浓缩液加入至体积为浓缩液体积4～10倍的含有0.1～0.2％胎牛血清的pH9～12磷酸盐缓冲液中，在140000～150000g、4℃下超速离心70～90min，取沉淀，重悬于pH9～12的磷酸盐缓冲液中，即得所述外吐小体。