发明名称 一种具有溶栓活性的全蝎提取物
摘要 本发明提供一种具有溶栓活性的全蝎提取物,涉及中药分离领域。所述具有溶栓活性的全蝎提取物,为分子量在1000-1500Da的小分子肽的混合物,采用如下方法制备:(1)将全蝎药材用溶剂浸泡,粉碎后,离心取上清液;将所述上清液超滤,取截留液采用硫酸铵沉淀法得到粗蛋白;(2)将步骤(1)得到的粗蛋白采用酶水解得到酶解液;(3)将步骤(2)所述酶解液透过液依次经过阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相层析,取具有酰胺水解活性的洗脱液即得具有溶栓活性的全蝎提取物。本发明具有溶栓活性的全蝎提取物,具有较强的纤溶活性和抗凝血活性,去除了全蝎中大量的杂蛋白,活性成分的回收率高,纯化倍数高。
申请公布号 CN103396472B 申请公布日期 2015.04.29
申请号 CN201310252368.2 申请日期 2013.06.24
申请人 陕西步长制药有限公司;南京中医药大学 发明人 郭立玮;付廷明;田晓然;刘峰;张伟
分类号 C07K7/06(2006.01)I;C12P21/06(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I;A61K35/646(2015.01)I;A61K38/08(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I 主分类号 C07K7/06(2006.01)I
代理机构 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 代理人 张立荣
主权项 具有溶栓活性的全蝎提取物,其特征在于:为分子量在1000‑1500Da的小分子肽的混合物,采用如下方法制备(1)将全蝎用溶剂浸泡,湿法超微粉碎提取,离心取上清液;将所述上清液超滤,取截留液采用硫酸铵沉淀法得到全蝎粗蛋白;(2)将步骤(1)得到的全蝎粗蛋白采用酶水解得到酶解液;步骤(2)的具体方法为:将所述全蝎粗蛋白悬于人工胃液中,在36.5‑37.5℃条件下水解4‑6h后,离心取上清即得酶解液;所述人工胃液为:含有浓度为4000‑8000U/ml的胃蛋白酶水溶液,pH为1.5‑2.5;(3)将步骤(2)所述酶解液依次经过阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相层析,取具有酰胺水解活性的洗脱液即得具有溶栓活性的全蝎提取物;所述阴离子交换层析中的介质DEAE‑Sepharose FF;所述凝胶过滤层析过程为:先采用Sephadex G‑75凝胶过滤层析,然后采用Sephadex G‑25凝胶过滤层析;所述反相高效液相层析中使用的色谱柱为C18柱。
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