同时检测禽畜肉制品中五种有机锡农药残留的二级质谱方法

摘要

同时检测禽畜肉制品中五种有机锡农药残留的二级质谱方法，按样品中蛋白质含量确定所需添加甲酸-乙腈的体积以进行有机锡提取、衍生与净化；进行标准工作液的衍生制备，五种有机锡为三唑锡、三环锡、三苯基氢氧化锡、三苯基氯化锡和苯丁锡，衍生物有三种，采用气相色谱-三重四级杆质谱检测，得到标准工作曲线；采用外标法检测三种有机锡农药衍生物残留量：用标准曲线进行定量分析，得到样品有机锡农药浓度与残留量。本发明利用了具有极高的灵敏度的GC-MS/MS检测方法，确立了以蛋白质为提取液添加量的依据，对三种有机锡衍生物的一级和二级质谱断裂途径进行了解析，并确立了具体的质谱条件，是一种快速高效的动物性食品中有机锡农药检测方法。

主权项

一种同时检测禽畜肉制品中五种有机锡农药残留的二级质谱方法，其特征是该方法包括以下步骤：a、提取：首先测定肉制品样品中蛋白质的含量，然后称取4.0g样品，再按照下列对应关系确定所需添加1％的甲酸‑乙腈的体积；蛋白质低于20％时，添加20mL 1％的甲酸‑乙腈；蛋白质在20.0％至24.0％时，添加40mL 1％的甲酸‑乙腈；蛋白质高于24.0％时，添加50mL 1％的甲酸‑乙腈；均质2min，然后加入5mL磷酸盐缓冲液，加入5g氯化钠，在水平振荡器上振荡30min，5000r/min下离心5min，取上清液10ml于旋转蒸发仪浓缩至近干，再用氮气吹干；加入2mL甲醇溶解残留物，用氮气吹至1mL，得到待衍生的提取溶液；b、衍生：将上述提取溶液加入5mL乙酸‑乙酸钠缓冲溶液(pH＝4.5)及1mL 2％四乙基硼化钠(NaBEt₄)水溶液，迅速旋上瓶盖，超声衍生反应15min，加入2mL正己烷提取衍生产物，混匀，离心后取上层上清液1ml，待净化；c、净化：先用6mL正己烷预淋洗Florisil固相萃取小柱，待Florisil柱中溶液的液面降至无水硫酸钠层时，将上述衍生的上层有机相取1mL转移至Florisil柱上；再用8mL正己烷/丙酮(99:1,v/v)溶液进行洗脱，收集全部流出液，35℃下氮气吹干，用正己烷溶解并定容至1mL，供GC‑MS/MS测定；d、有机锡农药混合标准工作液的衍生制备：所述的五种有机锡分别为三唑锡、三环锡、三苯基氢氧化锡、三苯基氯化锡和苯丁锡，三唑锡会转化为三环锡，所以三唑锡、三环锡的乙基化衍生物为同一种化合物三环己基乙基锡，三苯基氢氧化锡和三苯基氯化锡的乙基化衍生物也为同一种化合物三苯基乙基锡，苯丁锡的衍生物为三(2‑甲基‑2‑苯基丙基)乙基锡。取五种浓度分别为10、50、100、200、500μg/L的三环锡、三苯基氢氧化锡和苯丁锡三种有机锡混合标准工作液各1mL到五个15ml离心管中，分别加入5ml乙酸‑乙酸钠缓冲溶液(pH＝4.5)及1ml 2％四乙基硼化钠水溶液，超声衍生反应15min后，加入1ml正己烷提取衍生产物，混匀，离心后取上清液，即得到有机锡农药衍生物标准工作液；采用气相色谱‑三重四级杆质谱(GC‑MS/MS)检测，得到标准工作曲线。e、采用外标法检测步骤c得到的待测溶液中的三种有机锡农药衍生物残留量：将样品待测溶液在下进行GC‑MS/MS检测，将得到的三种有机锡衍生物的峰面积用上述d步骤中的标准曲线进行定量分析，计算得到样品待测溶液中各有机锡农药的浓度，从而计算得出样品中各有机锡农药的残留量。