发明名称 |
一种宏基因组DNA的提取方法及其试剂盒 |
摘要 |
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种宏基因组DNA的提取方法。该方法包括:取待测样品与裂解液混合后,经溶菌酶溶液处理、震荡破壁、蛋白酶K处理后,经NaCl处理、异丙醇处理、乙醇洗涤,即得;本发明通过在提取前加入裂解液和溶菌酶,并调节提取条件,使微生物细胞壁更易破碎,DNA分子更多的溶出,从而保证了提取所得DNA的丰度、片段完整性和纯度,且操作简单,成本较低。实验表明,采用本发明提供的方法提取唾液宏基因组DNA或对细菌、真菌的总DNA进行提取,与现有试剂盒相比,所得产物经PCR后电泳条带更加清晰,特别是对唾液样本的提取,所得产物经PCR后电泳条带较用现有试剂盒提取的结果更加清晰,明亮,完整。 |
申请公布号 |
CN104560951A |
申请公布日期 |
2015.04.29 |
申请号 |
CN201410724663.8 |
申请日期 |
2014.12.03 |
申请人 |
复旦大学泰州健康科学研究院;复旦大学 |
发明人 |
陈兴栋;叶为民;吕明;王笑峰 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
北京集佳知识产权代理有限公司 11227 |
代理人 |
赵青朵 |
主权项 |
一种基因组DNA的提取方法,其特征在于,包括:将待测样品与裂解液混合,经溶菌酶溶液处理、震荡破壁、蛋白酶K处理后,经NaCl处理、异丙醇处理、乙醇洗涤,即得;所述溶菌酶溶液的pH值为8.0,其中包括:20mM Tris‑Cl、2mM EDTA、体积百分数为1.2%的Triton X‑100、溶菌酶20mg/mL。 |
地址 |
225300 江苏省泰州市医药城医药大道1号G01栋 |