一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法

摘要

本发明涉及一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，属于生物检测技术领域。以硝基安定为内标，采用蛋白沉淀法，通过血浆样品预处理、色谱、质谱和内标法计算得到定血浆中香紫苏醇浓度。本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，为香紫苏醇在动物体内的药物代谢动力学研究奠定了方法学基础。

主权项

一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，其特征是步骤为：（1）血浆样品预处理：取血浆样品，加入内标硝基安定，加入甲醇沉淀蛋白，离心取上清液；（2）色谱：将步骤（1）预处理后的血浆样品进行液相色谱分离：色谱条件中色谱柱：Phenomenex kinetex XB‑C18柱；流动相：甲醇：水体积比为80：20，流动相中还含有10mM醋酸铵；流速：200~300μL/min；柱温：30~35℃；进样量：10μL；（3）质谱：离子源：电喷雾离子化ESI离子源，方式扫描：选择反应检测扫描（SRM），喷雾电压：3500~4000V，鞘气：20~50psi，辅助气：10~20arb，毛细管温度：350℃，离子源温度：300℃；检测离子：香紫苏醇选择性反应检测离子[M+H]⁺ m/z 309.0→ m/z 230.9  CE: 11eV；内标硝基安定选择性反应检测离子[M+H]⁺ m/z 282.3 → m/z 236.2  CE: 23eV；（4）计算：采用内标法，以香紫苏醇和内标硝基安定的峰面积比值代入标准曲线方程，计算香紫苏醇的血药浓度。