信号放大型免疫荧光探针及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种信号放大型免疫荧光探针及其制备方法和应用。该探针的制备方法包括：在缩合剂的存在下，对苯二胺和均苯三甲酸经缩合反应得到多羧基大分子；多羧基大分子经活化后，依次加入抗体、聚赖氨酸进行反应；再用荧光标记物标记，制得所述的探针。或者，其制备方法包括：将抗体、聚赖氨酸分别加入生物素溶液中反应生成相应的复合物，再用荧光标记物标记；将荧光标记的抗体-生物素复合物与链霉亲和素溶液混合进行反应，再加入荧光标记的聚赖氨酸-生物素复合物继续反应，制得所述的探针。通过上述方法制得的探针，标记有较多荧光标记物，结构稳定，易保藏；用于荧光免疫检测，具有检测灵敏度高、检测时间短、成本低等特点。

主权项

一种信号放大型免疫荧光探针的制备方法，包括：(1)将抗体加入生物素溶液中，搅拌反应1‑2h，然后加入荧光标记物进行标记，制得荧光标记的抗体‑生物素复合物；(2)将聚赖氨酸加入生物素溶液中，搅拌反应1‑2h，然后加入荧光标记物进行标记，制得荧光标记的聚赖氨酸‑生物素复合物；(3)将步骤(1)制得的荧光标记的抗体‑生物素复合物与链霉亲和素溶液混合，反应0.5‑1h；然后加入步骤(2)制得的荧光标记的聚赖氨酸‑生物素复合物，继续反应0.5‑1h，制得信号放大型免疫荧光探针；步骤(3)中，所述荧光标记的抗体‑生物素复合物、链霉亲和素与荧光标记的聚赖氨酸‑生物素复合物的摩尔比为1:3:10‑1:5:15。