一种杉木初代培养芽诱导方法

摘要

本发明公开一种杉木初代培养芽诱导方法，采用杉木基部萌条为外植体，通过外植体无菌处理后，将外植体接种于优质初代培养的芽诱导培养基上，置于适宜的温度、湿度和光照强度的条件下进行培养，诱导芽的萌发。本发明改进了现有杉木的芽诱导技术，克服杉木芽诱导过程中外植体褐变以及玻璃化等问题，提高杉木芽诱导率，出芽指数以及萌芽生长状况，获取数量多、质量好的萌芽，从而满足增殖培养的需要，促进杉木组织培养快速繁殖体系的建立，具有较好的经济效益和社会效益。

主权项

一种杉木初代培养芽诱导方法，其特征在于：采用杉木基部萌条为外植体，通过外植体无菌处理后，将外植体接种于优质初代培养芽诱导培养基上，置于适宜的温度、湿度和光照强度条件下进行培养，诱导芽的萌发；其操作步骤为，（1）外植体选择：选择杉木基部萌发的半木质化的萌条为外植体；（2）外植体消毒及接种：将杉木萌条针叶剪去，经过洗洁精清洗，流水冲洗和化学试剂处理消毒后，剪切成茎段接入培养基中；所述的消毒及接种是将杉木萌条针叶剪去，置于三角瓶中，加入浓度为1~5 %的洗洁精溶液，采用纱布封住瓶口，置于转速为200 r/min的摇床上清洗10~15 min后置于流水下冲洗1~2 h，然后用无菌水清洗2次，将外植体转到超净工作台上用0.15 %升汞溶液灭菌9 min；再采用无菌水冲洗8~10次后剪成长为2.0~2.5 cm长的茎段接种于芽诱导培养基中，每瓶接种2个茎段；（3）芽诱导培养：将接种后的外植体置于适宜室内条件下培养；所述的芽诱导培养基包括改良1/2MS~MS培养基，激动素6‑糠氨基嘌呤（KT），维生素C，琼脂和蔗糖；其中改良1/2MS~MS培养基的大量元素中NH₄NO₃含量为550~1100 mg/L；激动素6‑糠氨基嘌呤（KT）含量为0.5~2.0 mg/L；维生素C含量为10~15mg/L；琼脂含量为0.8 %和蔗糖含量为3%；在所述的升汞溶液每150~200 ml中滴1滴吐温20，搅拌均匀。