参与精子转染外源DNA的基因筛选方法

摘要

参与精子转染外源DNA的基因筛选方法，它涉及一种参与精子转染外源DNA的基因筛选方法。本发明的目的是提供一种筛选参与精子转染外源DNA基因的方法。方法：一、构建重组质粒pGB-mCD4；二、cDNA文库筛选获得待测基因；三、待测基因阳性克隆抽提酵母质粒并扩增；四、质粒pGB-mCD4与待测基因阳性克隆酵母质粒共转入酵母双杂交菌株Y190；五、进行β-galactosidase显色反应，显色结果变蓝的为阳性，分析，获得参与精子转染外源DNA的基因。通过本发明的方法能够大量、快速的获得与CD4共同作用转运外源DNA的基因，为精子介导基因转移机理的研究开辟新的思路，最终为建立简单、稳定、高效的精子介导转基因方法学奠定基础。

主权项

参与精子转染外源DNA的基因筛选方法，其特征在于按以下步骤进行基因筛选：一、构建重组质粒pGB‑mCD4；二、cDNA文库筛选获得待测基因；三、待测基因阳性克隆抽提酵母质粒并扩增；四、质粒pGB‑mCD4与待测基因阳性克隆酵母质粒共转入酵母双杂交菌株Y190；五、进行β‑galactosidase显色反应，显色结果变蓝的为阳性，分析，获得参与精子转染外源DNA的基因。