一种同时测定16种人参皂苷单体HPLC方法

摘要

本发明提供一种同时测定Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、protopanaxatriol、Compound K、Rh2、protopanaxadiol16种人参皂苷单体HPLC方法，测定范围包括含有上述1种以上皂苷单体的人参、西洋参等药用植物及其制剂；与现有技术相比，本专利同时测定的人参皂苷单体种类多达16种，提高了效率；本专利只用乙腈和水作流动相，解决了磷酸盐对色谱柱损耗大,系统清洗麻烦等问题；本专利建立的HPLC方法线性范围广、方法准确、重现性好、快捷简便、稳定可靠。本专利为人参、西洋参等药用植物及其制剂的质量控制提供理论依据。

主权项

一种同时测定16种人参皂苷单体HPLC方法，所测定的16种人参皂苷单体分别为Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、protopanaxatriol、Compound K、Rh2、protopanaxadiol，测定样品范围包括含有上述皂苷中1种以上的人参、西洋参及其制剂；由以下步骤完成：（1）对照品溶液的制备分别精密称取16种人参皂苷单体对照品Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、protopanaxatriol、CK、Rh2、protopanaxadiol 5mg，至于5ml容量瓶，用甲醇溶解并定容，制得1mg﹒ml^‑1的溶液；（2）样品溶液的制备分为固体样品和液体样品两种：精密称取固体样品人参及其制剂粉末1g，用滤纸包好，放置索氏提取器中，加适量石油醚，80℃回流提取4h，弃去石油醚液，加适量甲醇，80℃回流提取10h，收集提取液,加色谱纯甲醇定容，用0.45μm滤膜过滤入样品瓶备用；液体样品直接用0.45μm滤膜过滤入样品瓶备用；（3）16种人参皂苷单体含量测定标准曲线的建立色谱条件：C18色谱柱为150×4.6mm，5μm；流动相为乙腈和水，流动相梯度洗脱条件：0min为18%乙腈，40min为21%乙腈，42min为26%乙腈，46min为32%乙腈，66min为33.5% 乙腈，71min为38%乙腈，86min为65%乙腈， 91min为65%乙腈，96min为85%乙腈，103min为85%乙腈，105min为18%乙腈，106min为18%乙腈；流速1.0 mL﹒min^‑1；检测波长 203 nm，柱温35℃；将1.0mg﹒ml^‑1的对照品溶液进样2uL，4uL，6uL，10uL,16uL,20uL,建立标准曲线，计算每个皂苷单体线性回归方程；（4）样品中人参皂苷含量的测定按上述标准曲线色谱条件对制备的样品溶液进行测定，制备的样品溶液进样量为20uL,利用线性回归方程，计算样品中16种人参皂苷含量。