发明名称 |
一种脂肪干细胞的原代分离培养方法 |
摘要 |
本发明公开了一种脂肪干细胞的原代分离培养方法,包括以下步骤:1)洗涤脂肪组织;2)在脂肪组织中加入等体积的I型胶原酶和胰蛋白酶的混合液体;3)加入FBS,盖上瓶盖后封口摇匀,离心;离心后弃上清液;4)用含有FBS的DMEM重悬沉淀,沉淀与含有FBS的DMEM的体积比为1:1,吹打均匀后形成细胞悬液;将细胞悬液接种至培养基中;5)把接种后的培养基培养;6)培养后,转移细胞培养箱中继续培养。本发明的所探索的酶解条件稳定、高效,脂肪组织被彻底酶解,各成分细胞被最大化的释放出来;在不影响ADSCs的活性的前提下,单位脂肪体积所获得的ADSCs的量相对稳定。 |
申请公布号 |
CN104560868A |
申请公布日期 |
2015.04.29 |
申请号 |
CN201410710108.X |
申请日期 |
2014.11.27 |
申请人 |
广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
发明人 |
王一飞;陈海佳;葛啸虎;卢瑞珊;马岩岩;王小燕 |
分类号 |
C12N5/0775(2010.01)I |
主分类号 |
C12N5/0775(2010.01)I |
代理机构 |
广州圣理华知识产权代理有限公司 44302 |
代理人 |
顿海舟;陈业胜 |
主权项 |
一种脂肪干细胞的原代分离培养方法,其特征在于,包括以下步骤:1)获得脂肪组织,清洗;2)在脂肪组织中加入等体积的I型胶原酶和胰蛋白酶的混合液体;其中混合液体中I型胶原酶和胰蛋白酶的质量百分数分别为0.05%~0.3%和0.01%~0.1%,充分混匀后消化30~60min;3)加入FBS,盖上瓶盖后封口摇匀,离心;离心后弃上清液;4)用含有FBS的DMEM重悬细胞沉淀,细胞沉淀与含有FBS的DMEM的体积比为1:1,吹打均匀后形成细胞悬液;将细胞悬液接种至含有FBS的高糖DMEM培养基中;5)把接种后的培养基转移至细胞培养箱中培养;6)培养24~72h后,吸弃皿内培养基,清洗后添加含有EGF和FBS的DMEM,转移细胞培养箱中继续培养。 |
地址 |
510000 广东省广州市国际生物岛螺旋四路一号生产区第五层502单元 |