一种基于双分子互补的共价修饰标记来检测蛋白相互作用的方法

摘要

本发明提供一种基于双分子互补的共价修饰标记来检测蛋白相互作用的方法。该方法是利用snap标签蛋白在其41位或75位拆分所得的两部分片段，分别与被研究的一对蛋白进行融合；若被研究的蛋白之间存在相互作用，则融合蛋白被snap标签蛋白底物共价修饰，通过荧光成像或斑点免疫印迹的方法检测蛋白质之间的相互作用。本发明提供的方法可以在体外或在大肠杆菌、哺乳动物细胞中检测蛋白质之间的相互作用，该方法消除了双分子互补时自结合所造成的假阳性问题；其中基于snap标签蛋白在75位拆分的方法，具有检测时更低信号背景的特点，基于snap标签蛋白在41位拆分的方法，具有更高检测信号的特点。

主权项

一种基于双分子互补的共价修饰标记来检测蛋白相互作用的方法，其特征在于，所述方法利用对snap标签蛋白的拆分所得的两部分片段，分别与被研究的一对蛋白进行融合形成融合蛋白；若被研究的蛋白之间存在相互作用，则融合蛋白被snap标签蛋白底物共价修饰标记，通过荧光成像或斑点免疫印迹的方法在体外或在大肠杆菌、哺乳动物细胞中检测蛋白质之间的相互作用。