包涵体的预处理方法

摘要

本发明涉及一种包涵体的预处理方法，其包括一个细胞破碎的步骤、一个包涵体的洗涤步骤、一个包涵体的溶解步骤。将经过离心收集的细胞培养物在高压氮气的作用下采用超声波破碎，再加入絮凝剂澄清，弃去上清液得到富集包涵体的沉淀，再将得到的富集包涵体的沉淀采用由变性剂、除垢剂、电解质组成的缓冲剂经过3－10次浆化－微孔过滤得到洗涤后的包涵体，将洗涤后的包涵体采用由质量分数0.01－0.2％PMSF、3－6mol/l尿素和1－3mol/l盐酸胍配制的强变性剂进行溶解，溶解完毕后经过澄清，将上清液倒去即可得到纯净的包涵体。本发明提供的一种包涵体的预处理方法，预处理时间短，工艺简单，试剂消耗少，成本低且蛋白质的活性不易受损。

主权项

一种包涵体的预处理方法，其特征在于：包括一个细胞破碎的步骤、一个包涵体的洗涤步骤、一个包涵体的溶解步骤；在所述的细胞破碎的步骤中，将经过离心收集的细胞培养物在高压氮气的作用下采用超声波破碎，再加入絮凝剂澄清，弃去上清液得到富集包涵体的沉淀；在所述包涵体的洗涤步骤，将得到的富集包涵体的沉淀采用由变性剂、除垢剂、电解质组成的缓冲剂经过3－10次浆化－微孔过滤得到洗涤后的包涵体；在所述的包涵体的溶解步骤，将洗涤后的包涵体采用由质量分数0.01－0.2％PMSF、3－6mol/l尿素和1－3mol/l盐酸胍配制的强变性剂进行溶解，溶解完毕后经过澄清，将上清液倒去即可得到纯净的包涵体。