一种荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法

摘要

一种荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法，采用EMS处理诱变荞麦种子，通过乙烯合成的直接前体ACC筛选对乙烯不敏感的荞麦突变体，然后将荞麦突变体栽培于盐度为0.4％～0.6％的盐碱地中，筛选耐盐植株，收取的荞麦种子，再次播种于盐度为0.4％～0.6％的盐碱地，进一步筛选性状稳定的荞麦耐盐突变体。本发明之荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法，通过EMS诱变容易得到突变体，并且点突变对DNA损伤较小，同时结合利用ETH的直接前体ACC筛选相结合来筛选荞麦耐盐突变体，诱变频率高，目标明确，筛选效率高，可达10％～20％，操作成本低，获得的突变体性状稳定。

主权项

一种荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)预处理荞麦种子：挑选籽粒饱满的荞麦种子，先用自来水洗净，接着用去离子水或蒸馏水振荡洗涤3～5h，吸水纸吸干；然后放入0.3％～0.4％甲基磺酸乙酯溶液中浸摇10～12h，捞出荞麦种子，最后用100mmol/L，pH 7.5的磷酸盐缓冲溶液冲洗2～3遍，去离子水或蒸馏水冲洗2～3遍，备用；(2)筛选荞麦突变体：将步骤(1)中备用的荞麦种子接种含有5μmol/L1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸或20μmol/L1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸的MS固体培养基上培养，筛选出对乙烯不敏感的荞麦突变体；(3)筛选荞麦耐盐突变体：将步骤(2)中筛选的对乙烯不敏感的荞麦突变体栽培于盐度为0.4％～0.6％的盐碱地中，筛选耐盐植株并收取种子；收取的荞麦种子再次播种于盐度0.4％～0.6％盐碱地，筛选性状稳定的耐盐突变体，收取种子。