一种基于ⅡB型限制性内切酶酶切的简化基因组建库方法

摘要

本发明涉及分子生物学技术领域，公开了一种基于ⅡB型限制性内切酶酶切的简化基因组建库方法，包含下述步骤：(1)以BsaXI酶对基因组DNA进行酶切；(2)对酶切产物连接接头一和接头二；(3)纯化连接产物；(4)对纯化后的产物进行PCR扩增；(5)纯化PCR产物，得到测序文库；其中步骤(2)中的两个接头分别由序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的两个核苷酸片段、序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：2所示的两个核苷酸片段杂交合成。本发明所提供的建库方法简便快捷，建库成本低，且建得文库的准确性高，可以更有效地进行高通量测序。

主权项

一种基于ⅡB型限制性内切酶酶切的简化基因组建库方法，其特征在于，包含下述步骤：(1)利用ⅡB型限制性内切酶对基因组DNA进行酶切，得到酶切产物；(2)对酶切产物连接接头一和接头二，得到连接产物；(3)对连接产物进行纯化，得到纯化后的连接产物；(4)将纯化后的连接产物进行PCR扩增，得到PCR产物；(5)对PCR产物进行纯化，得到测序文库；其中，步骤(1)中所述的ⅡB型限制性内切酶为BsaXI酶；步骤(2)中所述的接头一由序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的两个核苷酸片段杂交合成、所述的接头二由序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：2所示的两个核苷酸片段杂交合成。