金钱龟抗肿瘤多肽的制备方法

摘要

本发明提供金钱龟抗肿瘤多肽的制备方法。该方法为：取3～20 g金钱龟肉糜和超纯水混合后搅拌，配制成浓度为10～50% (w/v)的混合溶液，取质量和浓度都相同的混合溶液三份，分别加入木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶37017和复合蛋白酶Protamex，在控制条件下进行酶解，酶解完毕后灭酶，冷至室温，将酶解液离心，取上清液，得到三种酶解液；依次用截留分子量分别为10 KD、5 KD以及3 KD的超滤膜过滤，每种酶解液分别获得3种金钱龟多肽的酶解液。所得产品对乳腺癌细胞（MCF-7）和肝癌细胞（HepG-2）均具有抑制作用。所以本发明得到的金钱龟多肽有利于抗肿瘤药物和保健食品的开发利用。

主权项

金钱龟抗肿瘤多肽的制备方法，其特征在于,包括如下步骤：（1）取3～20 g金钱龟肉糜和超纯水混合后搅拌，配制成浓度为10～50% (w/v)的混合溶液，取质量和浓度都相同的混合溶液三份，分别加入木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶37017和复合蛋白酶Protamex，进行酶解，酶解过程中使用0.05～0.2 mol/L的NaOH或HCl来调节反应体系的pH值，控制pH值在pH±0.05之间，酶解完毕后灭酶，冷至室温，将酶解液离心，取上清液，得到三种酶解液；（2）取步骤（1）得到的三种酶解液，依次用截留分子量分别为10 KD、5 KD以及3 KD的超滤膜过滤，每种酶解液分别获得分子量大小范围为0‑3 KD、3‑5 KD和大于10 KD的金钱龟多肽的酶解液。