| 发明名称 | 一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法 | ||
| 摘要 | 本发明提供了一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法，该包括以下步骤：1)设计被敲除基因的5’端同源臂和3’端同源臂以及相应的通用引物；2)将上述同源臂、通用引物和欲插入的基因引入到载体中，得到打靶载体；3)转染细胞；4)PCR扩增鉴定插入结果。本发明主要是依托猪H11位点切割系统设计打靶载体，该载体它能够将外源基因精确的引入到猪的H11位点中，以解决传统打靶技术效率低下，PCR检测引物不便设计，检测难度大的问题。本发明提供的定点插入方法能让外源基因稳定在H11表达，为猪转基因搭建了稳定的平台。 | ||
| 申请公布号 | CN104531686A | 申请公布日期 | 2015.04.22 |
| 申请号 | CN201410699684.9 | 申请日期 | 2014.11.27 |
| 申请人 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 发明人 | 李奎;阮进学;杨述林;李和刚;牟玉莲;吴添文;魏景亮;徐奎;黄雷;周荣;刘楠 |
| 分类号 | C12N15/11(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I | 主分类号 | C12N15/11(2006.01)I |
| 代理机构 | 北京市京大律师事务所 11321 | 代理人 | 王凝;张波 |
| 主权项 | 一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)设计被敲除基因的5’端同源臂和3’端同源臂以及相应的通用引物；2)将上述同源臂、通用引物和欲插入的基因引入到载体中，得到在打靶载体；3)转染细胞；4)PCR扩增鉴定插入结果。 | ||
| 地址 | 100193 北京市海淀区圆明园西路2号 | ||