一种好氧反硝化菌剂及其制备与应用

摘要

本发明提供一种好氧反硝化菌剂，所述的菌剂中，含有施氏假单胞菌和地衣芽孢杆菌。另外公开了这种好氧反硝化菌剂的制备方法及其应用。本发明的施氏假单胞菌是从制皮革的工业废水中筛选出来的，最后经鉴定确定为本菌。从往常来说，本领域的人认为施氏假单胞菌为厌氧反硝化菌，本申请证实了本菌在好氧的条件下也能高效的反硝化，拓宽了施氏假单胞菌的使用范围，另外当两种菌剂联合使用的时候，可以大大的提高好氧条件下的反硝化的效率。

主权项

一种好氧反硝化菌剂在处理制革工业废水中的应用；所述好氧反硝化菌剂为施氏假单胞菌和地衣芽孢杆菌；所述好氧反硝化菌剂的筛选过程为：将制革工业废水先通过初筛营养型培养基，再通过选择性培养基，再通过反硝化培养基，最后通过发酵培养基，获得大量纯种菌株，所得的纯种菌株经鉴定为施氏假单胞菌和地衣芽孢杆菌；所述的培养基分别为以下成分：(1)初筛营养型培养基：LB培养基，单位为g/L：蛋白胨 10.0酵母膏 5.0NaCl 7.0琼脂 18.0pH 6.8‑7.2；(2)选择性培养基，单位为g/L：天冬酰胺酸 1.0KNO₃ 1.0KH₂PO₄ 1.0FeCl₂ 0.03CaCl₂ 0.1MgSO₄ 0.8BTB 1.0琼脂 20.0pH 7.0～7.2；所述BTB为溴百里酚蓝；(3)反硝化培养基，单位为g/L：琥珀酸钠 4.5NaNO₂ 0.005KH₂PO₄ 1.5Na₂HPO₄ 0.5NH₄Cl 0.6酪蛋白 5.0MgSO₄·7H₂O 1.0pH 7.0‑7.3；(4)发酵培养基：蛋白胨 10.0，酵母膏 5.0，NaCl 7.0，pH 6.8‑7.2；所述的菌剂为冻干粉；所述的好氧反硝化菌剂的制备方法，包括以下步骤：S1.分别发酵施氏假单胞菌和地衣芽孢杆菌，取菌液，离心得到菌泥，按质量比1:1混合；S2.添加冷冻干燥保护剂：向步骤S1所得菌泥中添加冷冻干燥保护剂，用生理盐水混匀，得混合菌液；S3.将步骤S2所得混合菌液均匀铺于托盘，于‑40℃低温冰箱预冻6‑10h；入冷冻干燥机，‑35℃续冻4‑8h；将冷冻干燥机的温度从‑35℃逐步上升到5℃，持续时间为30h‑48h；加入至温度为20℃‑25℃，干燥到含水量在3％以下时，出柜；S4.磨碎S3所得的冻干粉，过100目筛，即得；所述的冷冻干燥保护剂为淀粉和海藻糖的混合物；按重量比计，所述的淀粉用量为菌泥重量的0.25‑0.4倍；按重量比计，所述的海藻糖用量为菌泥重量的0.035‑0.05倍；所述的好氧反硝化菌剂的应用为先往曝气池中添加3～6g/L的好氧反硝化菌剂，然后补加0.3～0.06g/L的好氧反硝化菌剂。