一种锁核酸增敏的检测MTHFR基因C677T突变的探针及引物、试剂盒和检测方法

摘要

本发明公开一种锁核酸增敏的检测MTHFR基因C677T突变的探针及引物、试剂盒和检测方法。本发明利用锁核酸能灵活修饰TaqMan探针的特点，在检测MTHFR基因C677T突变的探针的合适的位置上进行锁核酸修饰，以增加探针的特异性。采用上述锁核酸增敏的检测MTHFR基因C677T突变的探针和引物对步骤(1)得到的样本基因组DNA进行荧光定量PCR扩增，测出野生型探针的Ct值和突变型探针的Ct值；设定Ct值在小于35个循环数为检出阳性；则只有野生型探针检出阳性的样本为野生纯合型CC；只有突变型探针检出阳性的为突变纯合型TT；而野生型探针和突变型探针都检出阳性的为CT杂合子。

主权项

一种锁核酸增敏的检测MTHFR基因C677T突变的探针，其特征在于，所述的探针序列如下：突变探针MTHFR 677T：5’‑荧光基团‑CGGG+AG+T+CGATTT‑淬灭基团；野生探针MTHFR 677C：5’‑荧光基团‑CGGG+AG+C+CGATTT‑淬灭基团；其中“+”表示3’端的碱基为锁核酸修饰碱基。