EGFR基因突变检测方法及试剂盒

摘要

本发明涉及基因工程及分子生物学领域，提供了一种EGFR基因突变检测方法及试剂盒。所述方法包括：A、利用EGFR特异性引物，对待测序样本中的目标区域进行扩增，得扩增产物；用于扩增每个目标区域的EGFR特异性引物中至少有一种PCR引物上含有可断裂位点或可切除序列；B、将扩增产物加至切割-连接反应体系中进行切割和连接，从而在扩增产物两端分别接上接头一和接头二，得文库分子；C、单分子扩增含接头一和接头二的文库分子，得单分子扩增产物；D、对单分子扩增产物进行高通量测序，得目标区域的序列信息。本发明的方法和试剂盒能够简化实验步骤，提高检测效率。

主权项

一种用于非疾病诊断治疗目的的EGFR基因突变检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A、利用EGFR特异性引物，对待测序样本中的目标区域进行扩增，得扩增产物；用于扩增每个目标区域的EGFR特异性引物中至少有一种PCR引物上含有可断裂位点或可切除序列；B、将扩增产物加至切割‑连接反应体系中进行切割和连接，从而在扩增产物两端分别接上接头一和接头二，得文库分子；所述切割‑连接反应体系包括：连接酶、断裂剂、接头一、接头二和连接缓冲液；所述断裂剂，用于对扩增产物中的可断裂位点或可切除序列进行特异性切割，形成第一粘性末端；C、单分子扩增含接头一和接头二的文库分子，得单分子扩增产物；D、对单分子扩增产物进行高通量测序，得目标区域的序列信息。