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一种那曲肝素钙的生产方法，其特征在于包括如下步骤：(1)肝素钠溶解在纯化水中，用4mol/L盐酸调节溶液pH至2.7±0.1，加入亚硝酸钠25±2℃条件下搅拌3‑4h，得到降解液，再用5mol/L氢氧化钠调节降解液pH至9.5‑10.0加入硼氢化钠搅拌≥15h，调节溶液pH至3.5±0.1搅拌20min，然后调节溶液pH至7.3‑7.5，254nm紫外灯照射溶液20‑25min进行灭菌，乙醇沉淀，测试沉淀物分子量及分布；步骤(1)中肝素钠和纯化水投料比为每1.0kg肝素钠配8.5‑10L纯化水，肝素钠和亚硝酸钠的投料比(W/W)为100：2.0‑3.0，亚硝酸钠和硼氢化钠的投料比(W/W)为1.0：0.3‑0.5，乙醇沉淀时，加入溶液体积和乙醇体积比(V/V)为1.0：0.8‑1.2；(2)将上述沉淀物加入纯化水溶解﹑再加入阴离子交换树脂吸附，配制与树脂同体积的氯化钙溶液加入树脂中洗涤，同条件洗涤2次，每搅拌1h后排出，30min沥干洗涤液,合并洗脱液在15‑20℃下搅拌5‑10min，加入乙醇再搅拌5‑10min，沉淀静置≥8h弃去上清液，检测沉淀物钙离子含量；步骤(2)中肝素钠和纯化水投料比为每1.0kg肝素钠配8.5‑10L纯化水，肝素钠和阴离子交换树脂投料比为每1.0kg肝素钠配4.5‑5.5L阴离子交换树脂，氯化钙的浓度为0.1mol/L，洗脱液和沉淀乙醇的投料比(V/V)为1.0：1.0‑2.5；(3)将上述沉淀物用纯化水溶解，加入氯化钙固体，氢氧化钙溶液调节pH至10.8‑11.0，30±2℃下加入过氧化氢氧化，维持pH在10.5‑11.0氧化4h，用盐酸调节pH至6.0‑6.5；步骤(3)中肝素钠和纯化水投料比为每1.0kg肝素钠配3.5‑5.5L纯化水，溶液体积和氯化钙的投料比为每100L溶液配0.8‑2.0kg氯化钙，调节溶液pH的氢氧化钙为饱和溶液，溶液总体积和过氧化氢投料比(V/V)为100：0.8‑1.5，所用的过氧化氢浓度为30％；(4)用纯化水冲洗0.45um滤膜和0.2um滤膜至中性，将0.45um及0.2um除菌过滤膜串联，将反应液通过该串联的过滤膜过滤，滤液用2.0倍的乙醇沉淀，静置≥8h，真空抽去上清液，加入乙醇脱水搅拌使之松散成细颗粒状静置≥1h，真空抽去上清液，相同的乙醇脱水操作重复四次，离心脱水真空干燥得到那曲肝素钙；步骤(4)中用滤液体积2.0倍体积的乙醇来沉淀滤液，用来脱水的乙醇和沉淀的乙醇投料比(V/V)为0.3‑0.5：1.0。 |
