一种草莓茎尖组织初代培养方法

摘要

本发明涉及一种草莓茎尖组织初代培养方法，包括如下步骤：1）匍匐茎的采集：匍匐茎采集时间为4-7月，选取顶端处于未展叶和第一张展叶之间、生长健壮的匍匐茎；2）匍匐茎处理：将采集的匍匐茎清洗、消毒后，在3-8℃下低温处理，处理时间72小时；3）消毒与接种：消毒和接种均在超净工作台内进行。本发明的优点是：1）可以有效防止外植体褐变的产生，保证外植体成活达到90%以上；2）采用的培养基能使外植体组织直接形成芽体，防止变异的发生，保证了后代种性的纯度；3）可以有效控制外植体的直径小于0.5mm，保证了外植体是不带有病毒，其繁殖出的后代完全无毒化。

主权项

一种草莓茎尖组织初代培养方法，其特征在于包括如下步骤：1)匍匐茎的采集：匍匐茎采集时间为4‑7月，选取顶端处于未展叶和第一张展叶之间、生长健壮的匍匐茎；2)匍匐茎处理：将采集的匍匐茎清洗、消毒后，在3‑8℃下低温处理，处理时间72小时；3)消毒与接种：消毒和接种均在超净工作台内进行，具体如下：3.1消毒：3.1.1将上述处理的匍匐茎，从顶部开始剪取5‑8cm；3.1.2用75％的酒精消毒15‑20秒；3.1.3有效氯浓度为1％的次氯酸钠溶液，消毒5‑10分钟；3.1.4灭菌水清洗后，备用；3.2接种：3.2.1外植体的摘取：在解剖镜下由外向内依次剥除生长点外围包裹的叶片，直到生长点暴露；3.2.2用解剖针针尖挑取生长点上部组织，接种到培养基中，接种到培养基中的外植体的直径小于0.5mm；培养：接种好的外植体在20℃下，暗下培养72小时，然后再放置于光下培养，培养条件25℃，2000lx，光周期为16小时光照8小时黑暗；培养10‑15d形成芽体，20‑30d展叶、生根，50‑60d植株大小为3‑5cm时，完成初代培养；所述培养基的组成是：MS+NAA0.1‑0.3mg/L+BA0.2‑0.5mg/L+蔗糖3％+琼脂8％，pH为5.8‑6.0；所述解剖针针粗度Φ为0.2‑0.4mm，针尖所取生长点组织不超过针的粗度。