发明名称 |
利用CRISPR-Cas9系统敲除动物FGF5基因的方法 |
摘要 |
本发明提供了一种利用CRISPR-Cas9系统敲除动物FGF5基因的方法。本发明首先获得针对FGF5第二外显子的sgRNA识别区的DNA序列,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示;接着构建FGF5第二外显子的sgRNA表达结构,并将T7启动子插入sgRNA转录起始位点前,同时构建Cas9蛋白的体外转录载体,以T7启动子调控。利用Cas9和sgRNA的体外转录载体获得Cas9 mRNA和sgRNA,可用于生产敲除FGF5基因的动物。 |
申请公布号 |
CN104531704A |
申请公布日期 |
2015.04.22 |
申请号 |
CN201410751079.1 |
申请日期 |
2014.12.09 |
申请人 |
中国农业大学 |
发明人 |
侯健;厉建伟;安晓荣 |
分类号 |
C12N15/113(2010.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N15/89(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/113(2010.01)I |
代理机构 |
北京路浩知识产权代理有限公司 11002 |
代理人 |
王文君 |
主权项 |
特异性靶向FGF5基因第二外显子的sgRNA,其特征在于,其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。 |
地址 |
100193 北京市海淀区圆明园西路2号 |