用于任何聚合酶延伸活性的灵敏的，定量的聚合酶活性检测和用于确定活细胞的存在的方法

摘要

公开了一种新的，高度灵敏，定量以及快速的DPE-PCR分析方法，可用于例如存在纯化或选择的细胞类型的原核细胞，并且能够在低于10cfu细菌联合到珠裂解水平可重复的检测DNA聚合酶延伸活性。还公开了本发明的DPE-PCR分析方法用于普通检测微生物的可能性，通过测定包括革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌或念珠菌的微生物平板。进一步，公开了本发明的DPE-PCR分析方法可用于评估细菌细胞生存力，通过可重复的DNA聚合酶延伸活性与cfu指示的增殖之间的强烈相关度而提供。相信本发明公开的分析方法可作为有用的定量工具，广泛用于药学、环境，食品和临床事件的检测。

主权项

一种检测样本中聚合酶活性的方法，作为包含活性聚合酶的活细胞或者亚细胞器存在的指标，该方法包括如下步骤：(a)将样本中作为聚合酶活性底物的核酸分子与样本接触；(b)在适合聚合酶活性的条件下孵育接触的样本；和(c)根据活化的聚合酶与底物核酸分子的作用结果确定核酸分子的存在(和/或定量)，从而指示样本中活细胞或亚细胞器或总聚合酶活性的存在。