一种急性分离心肌细胞的方法及装置

摘要

本发明公开了一种急性分离心肌细胞的方法及装置，在心肌细胞分离时心脏消化期间，每隔一段时间加入一定量碱液调节消化液pH，使其稳定的维持在7.40附近，与机体内环境保持一致；能够显著提高心肌细胞分离效果，同时排除心脏体积、消化时间、季节温度对分离效果的影响，增加分离效果的稳定性，获得稳定一致的高质量心肌细胞。

主权项

一种急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，包括以下操作：1)将离体的心脏行主动脉逆行插管后，将心脏悬挂于Langendorff灌流装置中，用消化液在37℃恒温恒流灌流心脏，其中消化液的灌流速度为8～10mL/min；所述的消化液为：心脏灌流液30mL、胶原酶I 30mg充分混合；所述的心脏灌流液为：MEM 5.55g、HEPES sodium salt 2.00g、BSA 0.5g、去离子水500mL充分混合，pH值为7.40；2)采用pH计监测分离过程中消化液的pH值变化，依据监测结果，每隔2.5min加入质量浓度为1％的氢氧化钠溶液，调节消化液的pH值为7.40，并使消化全程中的pH值稳定在7.40；3)当消化完成后，取出心脏，经剪碎吹打，获得急性分离的心肌细胞。