发明名称 一种选择性提取DNA的方法
摘要 本发明的一种选择性提取DNA的方法属于生物技术的技术领域。步骤有,将表面修饰后的固相介质和DNA样品的溶液混合,加入中性盐并使混合溶液中盐浓度为0.4~0.5mol/L,调节混合溶液pH至4~5,震荡20~30分钟,离心分离;再将吸附上清液的pH值调至3~4加入表面修饰后的固相介质,并震荡20~30分钟,离心分离;将每次分离出来的吸附了DNA分子的固相介质分别分散在pH为8.0~11.0的水溶液中,震荡20~30分钟;离心分离,即可分别获得不同长度的DNA溶液。本发明的方法可选择性提取DNA分子,具有选择提取效率高、原料简单廉价易得、操作快速便捷等优点。
申请公布号 CN104513819A 申请公布日期 2015.04.15
申请号 CN201410789081.8 申请日期 2014.12.17
申请人 吉林大学 发明人 刘玲玲;庄家骐;杨文胜
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 长春吉大专利代理有限责任公司 22201 代理人 王恩远
主权项 一种选择性提取DNA的方法,具体步骤为:(1)将用硅烷偶联试剂进行表面修饰的固相介质和DNA样品的溶液混合,表面修饰的固相介质的用量是全部DNA样品质量的100~200倍,加入中性盐并使混合溶液中盐浓度为0.4~0.5mol/L,调节混合溶液pH至4~5,将混合溶液震荡20~30分钟以完成长片段DNA分子与固相介质之间的静电吸附,所述的长片段DNA是指片段长度大于或等于400bp的DNA;采用离心分离的方式,分离吸附了长片段DNA的固相介质和含短片段DNA的吸附上清液;然后,将含短片段DNA的吸附上清液的pH值调至3~4,再加入表面修饰后的固相介质并震荡20~30分钟,以完成短片段DNA分子与固相介质之间的静电吸附,所述的短片段DNA是指片段长度小于或等于200bp的DNA;固相介质的用量大于或等于剩余DNA样品质量的300倍,采用离心分离方式,分离出吸附了短片段DNA的固相介质;(2)将两次分离出来的吸附了DNA的固相介质分别分散在pH为8.0~11.0的水溶液中,震荡20~30分钟以完成DNA分子与固相介质之间的静电脱附;采用离心分离的方式,分离出固相介质,分别获得长片段DNA溶液和短片段DNA溶液。
地址 130012 吉林省长春市前进大街2699号