一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法

摘要

本发明公开了一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法，通过基因工程菌在体外大量表达和纯化兔病毒性出血症病毒RHDV衣壳蛋白VP60抗原，将纯化的VP60抗原与适宜的佐剂制备成疫苗免疫产蛋鸡，并从鸡蛋中提取高效价抗RHDV的卵黄抗体，最后制备成可直接注射使用的抗体制剂。本发明建立的方法，是一种新的、安全、成本低、高效预防和治疗兔病毒性出血症的卵黄抗体制备方法，所制得的抗体用生理盐水溶解后，可直接通过耳缘静脉或皮下注射达到预防和治疗的作用，其紧急预防RHDV感染的作用达到100%，而早期治疗效率可达到95%。

主权项

一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法, 其特征在于包括以下步骤：（1） 免疫原的制备：通过PCR扩增技术获得RHDV的结构蛋白VP60的N端250个氨基酸序列VP60‑N，并实现其在基因工程菌中的表达，通过分离纯化获得VP60‑N重组抗原；（2）免疫产蛋鸡及提取卵黄抗体：将纯化的VP60‑N抗原蛋白经佐剂乳化免疫产蛋鸡，检测抗体的纯度、特异性及滴度后，大量提取纯化IgY卵黄抗体，冷冻干燥后将抗体干粉冻存；（3）制剂的制得：检测步骤（2）中得到的IgY卵黄抗体干粉，经无菌检验合格后，与生理盐水制备成安全的皮下或静脉注射用抗体制剂，或冷冻干燥形成干粉制剂后保存。