蚕丝支架的制备方法、应用以及三相蚕丝韧带移植物、制备方法

摘要

本发明提供一种蚕丝支架的制备方法、应用以及三相蚕丝韧带移植物、制备方法，将蚕丝编织成具有大孔结构的网状支架，将支架划分为三个区域：韧带区、软骨区、骨区，在三区分别种骨髓间充质干细胞、携带TGF-β基因慢病毒转染的骨髓间充质干细胞及携带BMP-2基因慢病毒转染的骨髓间充质干细胞，卷折分区修饰的网状支架，形成具有生理过渡结构的仿生韧带移植物，本发明不仅避免了软硬组织直接连接造成的应力集中的问题，而且种植基因修饰的骨髓间充质干细胞具有良好的定向分化特性，节省了种植多种不同细胞的培养时间和步骤，还解决了目前单相组织工程韧带存在的韧带移植物-骨结合部生物固定不牢靠的问题以及传统方法细胞无法长入深层的问题。

主权项

一种三相蚕丝韧带移植物，其特征在于：包括卷折为柱状的蚕丝支架、骨髓间充质干细胞、携带TGF‑β基因慢病毒转染的骨髓间充质干细胞和携带BMP‑2基因慢病毒转染的骨髓间充质干细胞，所述蚕丝支架包括具有微孔结构的蚕丝支架本体，蚕丝支架本体的一侧表面依次划分为第一过渡区、韧带重建中心区和第二过渡区，第一过渡区和第二过渡区分别位于柱状的蚕丝支架的两端，第一过渡区以及第二过渡区沿蚕丝支架的卷折方向依次划分为韧带重建边缘区、软骨修饰区以及骨修饰区，骨髓间充质干细胞位于韧带重建中心区和韧带重建边缘区，携带TGF‑β基因慢病毒转染的骨髓间充质干细胞位于软骨修饰区，携带BMP‑2基因慢病毒转染的骨髓间充质干细胞位于骨修饰区，所述韧带重建中心区以及韧带重建边缘区均采用丝素蛋白进行修饰，软骨修饰区采用明胶、透明质酸钠以及硫酸软骨素进行修饰，骨修饰区依次采用丝素蛋白以及羟基磷灰石进行修饰。