一种尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法

摘要

一种尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于：包括样品经稀释后直接引入液相色谱-电喷雾电离-串联质谱仪进行测定，可快速、准确检测出尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的含量水平。本发明为全新的尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸含量的测定方法，采用外表法定量分析物；串联质谱法更好的提高了方法的选择性与准确性。通过色谱柱以及洗脱条件的选择与优化，较好的提高了色谱分离过程，缩短了色谱分析的时间。

主权项

一种尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：a、收集志愿者尿液；b、样品前处理：室温下解冻尿液样品，混合均匀后，经过0.22 μm的滤膜过滤，取200 μL的尿液，加入0.80 mL纯水，取2 μL滤液引入液相色谱串联质谱分离分析；c、标准工作液配制：用纯水配制不同浓度的苯乙醛酸和苯乙醇酸混合标准工作溶液；d、液相色谱串联质谱测定，吸取配制好的不同浓度的苯乙醛酸和苯乙醇酸标准工作溶液，注入液相色谱串联质谱系统，选取Agilent Zorbax Eclipse XDB‑C18色谱柱，规格150 mm×2.1 mm，3.5 µm，初始流动相体系选取50% 溶剂A：水溶液和50% 溶剂B：甲醇溶液，等度洗脱，流动相流速为400 μL/min，分析时间为10 min，进样量为2 μL；串联质谱检测器的条件：电喷雾离子源，多反应监测负离子扫描方式；电喷雾电压：4500V, 雾化气：50 psi, 气帘气：35 psi, 辅助加热气：30 psi，射入电压：9 V，驻留时间：100 ms；苯乙醛酸和苯乙醇酸的线性回归方程分别为y=1.49×10⁴x+3.81×10³和y=1.35×10⁴x‑1.34×10⁴，其中Y代表分析物的峰面积，X表示尿液中目标分析物的浓度；相关系数大于0.999，对样品待测液进行测定，测得分析物的峰面积，代入一元线性回归方程，求得样品待测液中分析物的含量。