一种两步结晶从发酵液中提纯Ｌ-谷氨酰胺的方法

摘要

本发明提供一种两步结晶从发酵液中提纯Ｌ-谷氨酰胺的方法，通过对Ｌ-谷氨酰胺发酵液进行预处理，利用超滤膜和絮凝的方法去除发酵液中的固相物质；用离子交换的方法去除过滤液中的无机盐、色素杂质以及可溶性蛋白；低温真空浓缩，结晶并养晶；利用活性碳进一步去除色素以及可溶性蛋白；最后将结晶物料脱水、烘干得Ｌ-谷氨酰胺精品，优点是纯化得更彻底，使产品品质更优，更稳定。

主权项

一种两步结晶从发酵液中提纯Ｌ‑谷氨酰胺的方法，其特征在于步骤为：1）对Ｌ‑谷氨酰胺发酵液进行预处理，利用超滤膜和絮凝的方法去除发酵液中的固相物质；2）用离子交换的方法去除过滤液中的无机盐、色素杂质以及可溶性蛋白；3）低温真空浓缩，使料液中Ｌ‑谷氨酰胺质量百分比含量达到22~24%；4）将浓缩后的物料置于结晶罐中结晶并养晶；5）将结晶物料脱水得Ｌ‑谷氨酰胺粗品；6）将所得粗品重新溶解利用活性碳进一步去除色素以及可溶性蛋白；7）将脱色液真空低温浓缩至Ｌ‑谷氨酰胺质量百分比含量为25~30%；8）将浓缩后的物料置于结晶罐中结晶并养晶，将结晶物料脱水、烘干得Ｌ‑谷氨酰胺精品；步骤1）具体为：Ｌ‑谷氨酰胺发酵液降温至15~20℃，泵入截留分子量≥60000的超滤膜循环过滤，直至浓菌液中Ｌ‑谷氨酰胺质量百分比含量≤0.5%为止；往超滤液中流加浓度为0.2%的聚丙烯酰胺溶液，边流加边搅拌，直至出现大量絮凝团时停止流加，停止搅拌，静置30分钟左右，将上清液直接泵入超滤液贮罐，混浊液泵入板框过滤机；步骤2）具体为：阳离子柱再生至pH为4.5~5，阴离子柱再生至pH6.5~7；将滤液贮罐中的料液泵入阳离子柱，边上柱边检测流出液，当检到有Ｌ‑谷氨酰胺出现时开始收集流出液，直到检测到有Ｃa、Ｍg离子出现时停止收集；将阳离子柱收集液继续上阴离子柱，边上柱边检测流出液，当检到有Ｌ‑谷氨酰胺出现时开始收集，直到检测到有硫酸根离子出现时停止收集；步骤3）具体为：将离交收集液真空吸入升膜蒸发器，控制温度≤38℃，真空度≤－0.094ＭＰa，pH调至5.5~6，使浓缩液Ｌ‑谷氨酰质量百分比含量为10%±２%，将浓缩液泵入中间贮罐，降温至20℃；再将一级浓缩液真空吸入刮板式浓缩器继续浓缩，控制温度≤38℃，真空度≤－0.094ＭＰa，使浓缩液Ｌ‑谷氨酰质量百分比含量≥22%；步骤4）具体为：将二级浓缩的浓缩液泵入粗结晶罐，保持温度≤5℃，搅拌30分钟后静置16小时以上，中途每隔2小时搅拌10分钟；步骤5）具体为：将养晶充分的物料用离心机脱水至含水量质量百分比≤20%，得Ｌ‑谷氨酰胺粗品；步骤6）具体为：将粗品重新溶解，控制温度≤40℃，料液Ｌ‑谷氨酰胺质量百分比含量为6.5%，加入针剂活性碳适量充分搅拌，待脱色液透光度达到100%时滤去碳渣；步骤7）具体为：将脱色液真空吸入浓缩结晶锅，控制温度≤38℃，真空度≤－0.094ＭＰa，浓缩至Ｌ‑谷氨酰质量百分比含量达25~30%时中止浓缩；步骤8）具体为：将浓缩液泵入育晶锅，保持温度≤5℃，搅拌30分钟后静置20小时以上，中途每隔2小时搅拌10分钟；将养晶充分的物料用离心机脱水至含水量≤10%，得Ｌ‑谷氨酰胺精品；将Ｌ‑谷氨酰胺精品置于真空干燥机中烘干，控制温度≤50℃，真空度≤－0.094ＭＰa，烘干40分钟。