小麦线条花叶病毒的环介导等温扩增检测引物组、检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种小麦线条花叶病毒的环介导等温扩增检测引物组、检测试剂盒及检测方法，特点是LAMP的两对引物如下WSMV1-F3、WSMV1-B3、WSMV1-FIP、WSMV1-BIP，RT-LAMP反应体系如下：2μLWSMV1-FIP溶液，2μLWSMV1-BIP 溶液，0.25μLWSMV1-F3溶液，0.25μLWSMV1-B3 溶液，12.5μL 2×反应缓冲液，1μLBst DNA聚合酶和AMV逆转录聚合酶组成的聚合酶混合液，1μL钙黄绿素，2.5μL RNA模板，无Rnase的水补至25μL，检测方法包括总RNA的提取；RT-LAMP引物的设计和合成；配制 RT-LAMP反应体系；WSMV的RT-LAMP目视检测，优点是灵敏度高，特异性强且简便快速。

主权项

一种小麦线条花叶病毒的环介导等温扩增检测引物组，其特征在于LAMP的两对引物序列如下：外侧上游引物 WSMV1‑F3 ：5’‑acaaaggccatatacatgcc ‑3’；外侧下游引物 WSMV1‑B3：5’‑gcttcgcagctttgtacatt ‑3’；内侧上游引物 WSMV1‑FIP：5’‑tgttaagttgctcagttgtttaaagcctgaaatgataaata ‑3’；内侧下游引物 WSMV1‑BIP：5’‑cactgcataatcaacacaactaaactcgagttgctgctca ‑3’。