一种多倍体大花萱草组培方法及培养基

摘要

本发明提供一种多倍体大花萱草组培方法，同时还公开了适用于本发明组培方法的培养基，本发明方法提高了多倍体大花萱草的繁殖系数，弥补了传统组织培养技术的一些不足，如降低了外植体的污染率、提高了愈伤组织分化率和移栽成活率等。通过外植体采集、外植体消毒效果、生根效果、移栽苗成活率等方面均优于以往萱草品种的组培快繁技术，所建立的规模化商品生产体系稳定，生产周期只需2个月左右。加快多倍体大花萱草繁殖速度，打破繁殖的季节限制，实现育苗工厂化生产。本发明的组培配方是多倍体大花萱草大量扩繁的最佳组合，可以快速大量的繁殖组培苗，适应园林绿化市场需求。

主权项

一种多倍体大花萱草组培方法，其特征在于包括以下步骤：1）在植株抽蕾期，采集健壮的无病虫害的嫩叶、生长点、腋芽、花蕾、花瓣、花梗，作为组织培养的外植体，将采集到的外植体用洗衣粉水清洗干净，再放在流水下冲洗30min，在超净工作台上用75%酒精消毒5‑30s，再用无菌水冲洗3‑5遍，之后用0.1%（质量百分比）升汞消毒5‑20min；2）将消毒后的外植体接种到诱导培养基上，送入培养室进行无菌培养，培养基为MS 1L+NAA 0.2mg/L+6‑BA 0.5mg/L+2,4‑D 0.7mg/L+蔗糖3 mg/L、琼脂9 mg/L；将分化后的外植体转移到继代增殖培养基上进行继代培养，得到分化苗，继代培养基为MS+NAA 0.2mg/L+6‑BA 2.0mg/L+蔗糖3 mg/L、琼脂9 mg/L；3）将分化苗接种到壮苗培养基上进行壮苗培养，壮苗培养基为MS 1L+6‑BA 0.2 mg/L+IBA 0.04mg/L+马铃薯20g/L+蔗糖3 mg/L、琼脂9 mg/L；然后，将健壮的瓶苗转移到生根培养基上进行生根培养，生根培养基为MS 1L+NAA 0.02mg/L+蔗糖3 mg/L、琼脂9 mg/L；4）把生根后的组培苗移出培养瓶，借助毛刷洗净根部的培养基，将根部置于盛满水的容器中，置于炼苗室锻炼3‑5天，然后移栽到腐殖土：珍珠岩=1：1的基质中，得到成品；所述MS培养基的工作液浓度单位为mg/L，含：大量元素：NH₄NO₃ 1650、KNO₃ 1900、CaCl₂·2H₂O 440、MgSO₄·7H₂O 370、KH₂PO₄ 170；微量元素：KI 0.83、H₃BO₃ 6.2、MnSO₄·4H₂O 22.3、ZnSO₄·7H₂O 8.6、Na₂MnO₄·2H₂O 0.25、CuSO₄·5H₂O 0.0025、CoCl₂·6H₂O 0.0025；铁盐：FeSO₄·7H₂O 27.8、Na₂‑EDTA·2H₂O 37.3；肌醇 100、盐酸 0.5、盐酸吡哆醇 0.5、盐酸硫胺素 0.1、甘氨酸 2.0。