血样中微量伊马替尼测定方法及在零期临床试验中的应用

摘要

本发明涉及血样中微量伊马替尼测定方法及在零期临床试验中的应用。具体地说，本发明一个方面涉及一种测定生物样品中伊马替尼或其药用盐的方法，该方法使用高效液相色谱-串联质谱进行测定，并且包括以下步骤和测试条件：测试样品的处理、试样测定、液相色谱条件、质谱条件等。本发明还涉及本发明方法在伊马替尼或其药用盐的零期临床试验中的应用；以及本发明方法在伊马替尼或其药用盐的药代动力学试验研究中的应用。已经发现，具有本发明特征的检测方法可以有益地用于检测伊马替尼或其药用盐例如甲磺酸盐在其药物零期临床试验中生物样品例如血浆中的浓度测定。

主权项

测定生物样品中伊马替尼或其药用盐的方法，该方法使用高效液相色谱‑串联质谱进行测定，并且包括以下步骤和测试条件：(1)测试样品的处理：取100μL含药生物样品于1.5mL管中，加20μL甲醇，加入20μL内标溶液(300ng/mL)，涡旋混匀，加入100μL甲醇和200mL乙腈，涡旋50秒，于4℃14000rpm离心5min，取上清液200μl转移至1.5mL进样瓶中，作为测试样品待检测；(2)试样测定：取20μL测试样品注入高效液相色谱‑串联质谱仪中，检测样品中的伊马替尼和内标的色谱峰，并据此计算所述生物样品中的伊马替尼的浓度；(3)液相色谱条件：色谱柱：Phenomene C18 100A柱(3.0×50mm)；流动相：乙腈(含0.1％甲酸)：水(含2mmol/L乙酸铵和0.1％甲酸)，梯度洗脱(5：95，1min；90：10，3.5min；90：10，4min；5：95，4.1min；5：95，6min)，流速：0.4mL/min，进样量：20μL；(4)质谱条件：离子源：离子喷雾离子化源；离子喷射电压：5500V；温度：550℃；源内气体1(GS1，N2)压力：50psi；源内气体2(GS2，N2)压力：50psi；气帘气体(N2)压力：20psi；正离子方式检测；扫描方式：选择离子反应监测(MRM)方式；用于定量分析的离子反应分别为m/z494.3→m/z394.1(伊马替尼)和m/z 408.2→m/z235.0(MK0431，内标)。