一种斑点金免疫渗滤测定古代丝织品的方法

摘要

本发明公开了一种斑点金免疫渗滤测定古代丝织品的方法，采用微孔滤膜作为载体，将抗原或抗体点在膜上，封闭后加待测样本，洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原；可根据载体上有没有出现红色来进行定性分析。本发明的有益效果是：采用斑点金免疫渗滤的方法来检测古代丝织品，一方面，灵敏度高，操作简单。另一方面，成本低，反应时间短。

主权项

一种斑点金免疫渗滤测定古代丝织品的方法，其特征在于采用的步骤如下：A)取三个规格为4×3×0.6cm塑料小盒，分别在盖子的中央打一个直径约为0.3‑0.8cm的小孔；盖底填充两层吸水垫；吸水垫上面放置一片硝酸纤维素膜，即NC膜；然后在其中两个塑料盒子的NC膜上点加1‑2ml 0.5‑3mg/l的丝素蛋白溶液，室温下晾干，标记为I，II；I为阳性对照，II为阴性对照；取1g丝织品的文物样，将其溶解在100ml PH为7.4的磷酸盐缓冲中2h，取80‑100μL的上清液，将其点加在NC膜上，室温下晾干，标记为III；B)在I，II，III小孔下面的NC膜上，滴加80‑100μL的质量浓度为1%的牛血清蛋白溶液，保证溶液渗透到盒子内部；C)在I，III小孔下面的NC膜上，滴加80‑100μL 50‑100倍稀释的兔抗丝素蛋白抗体溶液，保证溶液渗透到盒子内部；II小孔加入PH为7.4的磷酸盐缓冲溶液，溶液渗透到盒子内部；D)在I，III小孔下面的NC膜上，滴加80‑100μL的PH为7.4的磷酸盐缓冲洗涤液，溶液渗透到盒子里，共洗涤三次；E)在I，II，III小孔下面的NC膜上，滴加80‑100μL100‑400倍稀释的胶体金标记的丝素蛋白抗体溶液，溶液渗透到盒子内部；F)在I，II，III下面的NC膜上，滴加80‑100μL的PH为7.4的磷酸盐缓冲溶液，溶液渗透到盒子里，洗涤；共洗涤三次；G)观察结果，I，III组的NC膜上有红色的斑点出现，II组的膜上没有红色斑点出现，说明检测的样品是丝织品。